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积雪草苷含量测定方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-09-02 | 205 次浏览 | 分享到:
积雪草苷是一种从积雪草中提取的有机化合物,具有抗炎和抗氧化等药理活性。它易溶于水、乙醇,但不溶于乙醚和氯仿。积雪草苷的提取方法包括粉碎、加入70%乙醇水溶液并进行超声波处理。检测积雪草苷的方法有滴定法和高效液相色谱法(HPLC),其中滴定法通过硫代硫酸钠液滴定来确定含量,而HPLC法使用C18色谱柱和特定的流动相进行分析。通过这些方法,可以准确测定样品中的积雪草苷含量。

积雪草苷是一种有机化合物,在水、乙醇中易溶,在与乙醚、氯仿中不溶。从积雪草中提取出来的,具有多种药理活性,如抗炎、抗氧化等。积雪草又名铜钱草、马蹄草,是一种多年生草本植物,在自然界中分布广泛。检测方法有滴定法、高效液相色谱(TLC)法、薄层色谱法等。



1.滴定法


积雪草苷的提取过程有多种方法,比如粉碎,加入溶剂,超声波提取。溶剂一般是70%乙醇水溶液,将粉末和溶剂混合,加热搅拌,超声处理,使得积雪草苷能够溶解。


标准曲线:精密量取对照品溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml,分别置于50ml具塞试管中,各加水至5ml,精密加入铜试液5ml摇匀,置沸水浴中加热15min,取出冷却。加入硫酸液(0.5mol/L)5ml,置冰浴中充分振摇,使氧化亚铜沉淀完全溶解,分别用硫代硫酸钠液滴定,加淀粉指示液1~2滴,至蓝色消失。另取水5ml按同法操作,作为空白,以两者滴定ml数的差数作为纵坐标,糖的mg数作为横坐标,绘制标准曲线。



以同样的方法测定样品,记录数据,结合标准曲线,计算出样品中的积雪草苷含量。


2. 高效液相色谱法(HPLC)


色谱条件:可以参考药典上的,以C18为色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),柱温30℃。流动相是乙腈和2mmol/L的β环糊精(比例通常为24:76),梯度洗脱,检测波长205nm,流速1ml/min,进样量10uL。



取适量羟基积雪草苷对照品和积雪草苷对照品,精确称量后,用甲醇配制成0.2mg/mL的溶液,梯度稀释6个点,进样10uL测定各自的色谱峰。吸取10uL供试品溶液,注入液相色谱仪进行测定,记录色谱图。通过样品的色谱峰面积,结合标准曲线,计算积雪草苷的含量。


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