原花青素是一类广泛存在于植物中的多酚化合物,具有抗氧化和消除自由基的作用。它们在酸性条件下加热可生成花青素,主要结构包括儿茶素和表儿茶素等聚合体。原花青素在葡萄籽中的含量最高,并且是强力的金属螯合剂,能保护和稳定维生素C。常用的检测方法包括分光光度法、高效液相色谱(HPLC)法、液相质谱联用(LC-MS)法等。分光光度法通过香草醛法等方法检测原花青素的含量,而HPLC法则通过样品处理、色谱条件设置和标准曲线制作来测定原花青素的含量。
原花青素是植物中广泛存在的一类多酚化合物的总称,具有抗氧化、消除自由基的作用。在酸性的条件下加热可以生成花青素,结构主要包括儿茶素、表儿茶素等聚合体。原花青素分布广泛,存在于许多植物的皮、壳、籽、核、花、叶中,葡萄籽中原花青素含量最高。它还是强有力的金属螯合剂,可以螯合金属离子,在体内形成惰性化合物,这个时候可以用原子吸收法测定其含量。此外,原花青素可以保护和稳定维生素C。

分子式:C30H26O13 分子量:594.52,检测方法包括分光光度法、高效液相色谱(HPLC)法、液相质谱联用(LC-MS)法、原子吸收法、毛细管电泳法等。
1.分光光度法
检测原花青素含量,分光光度法是一种常用的方法。里面还包括了铁盐催化法、香草醛法、钼酸铵法、硫酸高铵法等,适合于各种植物组织以及制剂中的原花青素含量检测,比如葡萄籽提取物等。以香草醛法为例子,原花青素的黄烷-3-醇单体的A环化学活性比较高,在酸性的条件下,上面的间苯二酚和香草醛发生缩合作用。其产物在浓硫酸或浓盐酸的作用下,形成红色的络合物。样品的浓度和颜色是呈正相关的,在波长为500nm的分光光度计上测定吸光度值,根据标准曲线,计算出样本中原花青素的含量。如果测的样本浓度高于标准曲线范围,要进行适当的稀释,从而获得相对准确的计算结果。

2.高效液相色谱(HPLC)法
HPLC法测定原花青素含量,主要包括样品处理、色谱条件设置、儿茶素和表儿茶素标准曲线、测定和计算等。

原花青素的提取有多种,其中包括溶剂法,即使用乙醇、甲醇、丙酮等将植物中的原花青素溶解出来,然后过滤、浓缩、沉淀,从而得到提取液。色谱条件的设置是相对重要的,可以通过参数选择,获得最佳的分离和测定效果。比如采用紫外检测器,波长280nm,流速1ml/min,进样量10uL,C18色谱柱,柱温30℃,以乙腈和水为流动相,梯度洗脱。标准曲线的制作,需要将儿茶素、表儿茶素标准品先溶解定容,得到标准储备液。然后,按梯度进行稀释,比如1:2,1:5,1:10,1:25,1:50得到标准溶液,在上述的条件下,上机测定色谱峰图。以浓度为横坐标,色谱峰面积为纵坐标,制作出标准曲线,计算回归方程,回收率。测定样品的原花青素,根据色谱峰面积,结合标准曲线,计算出样品中的原花青素(儿茶素和表儿茶素)含量。