三磷酸鸟苷即鸟嘌呤-5-三磷酸，英文简称GTP。GTP是DNA复制时候的引物，转录时候鸟嘌呤核苷酸的提供者。它是三羧酸循环中琥珀酸辅酶A转变为琥珀酸过程中的能量载体，可以和ATP相互转换，是细胞信号传导的重要物质。

检测样本中的GTP含量，主要的方法有高效液相色谱（HPLC）法、液质联用（LC-MS）法、酶联免疫吸附（ELISA）法等。就检测准确度方面，HPLC和LC-MS是相对高的，而从经济和快捷方面来说，就要看一下ELISA法。这里，简单的介绍一下ELISA试剂盒检测方法。双抗体夹心法主要用于检测较大分子的化合物含量，具有多个抗体结合位点，而竞争法则主要用于检测小分子化合物含量。

检测原理：ELISA法采用的是双抗体夹心法。微孔板里面有预先包被的三磷酸鸟苷捕获抗体，依次向微孔中加入样本溶液（根据情况稀释）、标准品（至少6个点的梯度稀释）、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。这个时候，发现了吗？一个微孔中是有2种不同的抗体，如果样本中GTP含量多，就和GTP捕获抗体结合的多，和HRP标记的检测抗体结合的也多。经过洗涤，可以把没有结合的抗体和样本溶液去除，剩下的是和样本GTP结合的捕获抗体和HRP标记的检测抗体。此时，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色，并在酸的作用下最终变化为黄色。颜色的深浅和样品中的GTP含量成正相关，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度值（OD值），根据标准曲线，计算样品中GTP的含量。

检测过程：试样加入微孔板-孵育-清洗-加入酶标结合物-孵育-清洗-加入底物-孵育-加入终止液，测定吸光度值。

试剂盒组成：微孔酶标板（96T或48T），标准品，样本稀释液，检测抗体-HRP，20x洗涤缓冲液，底物A，底物B，终止液，封板膜，说明书，自封袋等。

适用范围：血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物或植物样本等。