土壤有效磷是指能够被农作物吸收的磷的含量，在酸性的土壤中，用碳酸氢钠溶液提取有效磷。利用提取液中的重碳酸根、碳酸根降低土壤中的钙离子的活度，从而使得磷成分被浸提出来。酸性土壤用盐酸-氟化铵法，通过稀盐酸来溶解部分的磷，通过氟化铵中的氟离子和铁磷、铝磷的铁、铝在酸性条件下形成络合物，从而释放出来有效磷。在农业生产中一般采用土壤有效磷的指标来指导施用磷肥，土壤浸出液的有效磷含量，一般用钼锑抗比色法进行测定。

检测土壤有效磷含量的方法有碳酸氢钠法、盐酸-氟化铵法、电感耦合等离子体发射光谱（ICP）法等，这里说的是紫外/可见分光光度计测定土壤有效磷。

首先，要准备的是必需的试剂和溶液，如果是试剂盒的话，会有详细的说明书。硫酸，盐酸，5%硫酸溶液，酒石酸锑钾溶液5g/L，硫酸钼锑储备液10g/L，钼锑抗显色剂，二硝基酚指示剂，氨水溶液（氨水：水=1:3），氟化铵-盐酸浸提剂，硼酸溶液，磷标准储备液100mg/L，磷标准溶液5mg/L等。

接着，土壤样品中有效磷的提取。这个步骤是比较关键的，精密称量5.00g的土壤，通过2mm的筛孔，筛过置于200ml塑料瓶中，加入氟化铵-盐酸浸提液50ml，在25℃的条件下，振荡30min（180r/min），完工后用无磷滤纸过滤。用分光光度法来测定，就要用到空白对照，就是不加土壤样本的情况下，重复上面的提取过程。

下面，到了比较关键的步骤了，就是标准曲线的绘制。分别吸取5mg/L的磷标准溶液0.00mL、1.00mL、2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00mL于50mL容量瓶中，加入10mL的氟化铵—盐酸浸提剂，再加入10mL的硼酸溶液，摇匀，用蒸馏水都加到30ml。现在才刚刚开始，接着加入二硝基酚指示剂2滴，用硫酸溶液或氨水溶液调节到微黄色，慢慢的调，调过了就不好了。之后，加入钼锑抗显色剂5ml，用水定容到刻度，充分摇匀。这个时候，就配制出来含有效磷的量分别为0.00mg/L、0.10mg/L、0.20mg/L、0.40mg/L、0.60mg/L、0.80mg/L、1.00mg/L标准溶液。在室温下放置30min，用1cm光径比色皿，在波长为700nm的紫外/可见分光光度计上，以标准溶液的零点调零后测定吸光度值。以浓度为横坐标，以吸光度值为纵坐标，制作出来标准曲线了。

那么，到现在才正式开始测土壤样品。吸取处理好的土壤溶液10ml到50ml的容量瓶中，加入10ml的硼酸溶液，摇匀，加蒸馏水到30ml。接着，加入二硝基酚指示剂2滴，用硫酸或氨水来调节溶液到微黄色，加入5ml的钼锑抗显色剂，用蒸馏水定容。在室温下放置30min，用同样的方法测定吸光度值。可以多测几次，求取平均值，然后代入标准曲线，计算出样品中的有效磷含量。如果测定的磷浓度超过标准曲线的范围，就要对试样进行稀释，并重新测定。