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可溶性果胶含量测定方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-08-23 | 194 次浏览 | 分享到:

可溶性果胶主要存在于成熟的果蔬中,主要成分是有半乳糖醛酸甲酯,以及少量以1,4-苷键连接而成的长链高分子化合物,能够溶于水。微生物产生的酶参与果胶代谢过程,比如,在原果胶酶的催化作用下,原果胶与水反应生成可溶性果胶和多缩戊糖。可溶性果胶在果胶甲基脂酶的作用下,生成果胶酸和甲醇。果胶酸在多缩半乳糖酶的作用下,继续分解生成半乳糖醛酸。通过检测果实中可溶性果胶的含量,可以有效地判断果实的成熟度。评估食品的质量和风味,为食品加工和质量控制提供科学依据。



采用咔唑比色法测定可溶性果胶含量,检测原理:可溶性果胶能够在酸性条件下,水解为半乳糖醛酸,半乳糖醛酸与咔唑缩合生成紫红色化合物,该化合物在波长为530 nm处具有特征吸收峰,通过测定吸光值结合标准曲线,可计算出来可溶性果胶的含量。测定步骤包括提取、测定、标准曲线制作、结果计算等。


1.可溶性果胶提取


精准称取1g植物样本,放在研钵中磨成浆,放入到离心管中。加入25ml的95%的乙醇,在沸水浴上加热30min,煮沸的过程中如乙醇挥发,要及时补充,取出冷却,并8000r/min离心15min,弃去上清液。继续重复上面的步骤3-5次,将沉底放在试管中,加入20ml蒸馏水,在50℃水浴30min。溶解了果胶,去除了糖分和其他物质,可是怎么提取可溶性果胶呢?将保温后的溶液取出来,离心15min,用蒸馏水洗涤沉淀,定容到刻度,就是可溶性果胶了。



2.测定


将分光光度计预热30min,调节波长到530nm,蒸馏水调零。将提取液放入比色皿中,测定吸光度值,以空白对照。


3.标准曲线建立


用标准品稀释6个梯度浓度,以横坐标为浓度,以纵坐标为对应的测定的吸光度值,绘制标准曲线,得到回归方程。


4.计算结果


将样品检测到的吸光度值,代入回归方程,计算出样品的可溶性果胶的含量。



采用比色法检测可溶性果胶的优点是效率高、节省成本,操作简单。缺点是提取过程繁琐,准确度不是太高,而且硫酸具有强腐蚀性,高温加热的时候,需要小心。如果测定样品的吸光度值高出了标准曲线范围,可以对样品进行适当的稀释;如果吸光度值很低,就要增加样本量重新提取。不过,为了解决上述的难题,现在有使用试剂盒的检测,避免基础实验上失误。


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