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蒲公英菊苣酸检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-08-23 | 181 次浏览 | 分享到:

菊苣酸来源于菊苣、紫锥菊等蒲公英家族植物,它是一种酚酸类化合物,具有抗氧化、抗炎作用,影响葡萄糖和脂质代谢。菊苣酸的分子量是474.371,化学结构为苹果酸和二氢木糖酸的单体组成。这两种单体通过化学键连接在一起,形成了一个大分子结构。菊苣酸的结构式为HOOC-CH2-CH2-OH,结构式上有两个-COOH基团,它们是通过一个碳键以及一个氢键连接在一起,形成一个烷基羰基,以及一个烯烃结构。结构中含有两个手性碳原子,故存在L-菊苣酸、D-菊苣酸和内消旋-菊苣酸。菊苣酸通过减少细胞中的活性氧(ROS)和丙二醛,并清除自由基,抑制低密度脂蛋白的氧化,从而提高机体的抗氧化能力。



检测植物样本中的菊苣酸含量,主要方法有高效液相色谱(HPLC)法、液质联用(LC-MS)法等。


1.高效液相色谱(HPLC)法


菊苣酸的HPLC检测色谱条件,主要包括色谱柱类型、流动相组成、洗脱方式、检测波长、流速、柱温等参数。比如,通用的C18色谱柱,以乙腈和0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,紫外检测器,波长为280nm,柱温40℃,流速1.0ml/min,进样量10μL等。



称取一定量的菊苣酸标准品,加入适量的溶剂(甲醇或乙腈),制成标准品储备液。这个储备液是用来进行梯度稀释的,取6个点来上机检测,读取数据,记录色谱峰。以菊苣酸的浓度为横坐标,对应的色谱峰面积为纵坐标,绘制成标准曲线,计算回归方程和回收率。通常情况下,要确保标准曲线具有良好的线性关系,相关系数不低于0.99.如果太低了,就是操作过程出现了问题。


对样品适当的处理,加入溶剂溶解,超声并离心,制备成待测样品溶液。在和标准品相同的条件下,测定样品中的菊苣酸含量,通过比较样品色谱峰和标准曲线,确定出样品中的菊苣酸含量。可以参考《中国药典》2020版相关步骤和说明。


2. 液质联用(LC-MS)法


这种方法就是基于HPLC的分离功能,将菊苣酸化合物从样本中提取出来,并在质谱中打碎成离子,在电磁场的作用下以荷质比不同而进行深度分离,从而确定菊苣酸的含量。


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