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香兰素含量检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-08-20 | 166 次浏览 | 分享到:

香兰素的化学名为4-羟基-3甲氧基苯甲醛,它具有羟基、醛基、甲氧基的特点。是一种能够产生清甜豆香气息的香料,可能用在食品、医药、化妆品、化工等领域。香兰素中存在酚醛基,非极性的,具有疏水性。能够使细胞膜变得不稳定,细胞壁出现凹陷,破坏细胞结构,甚至影响酶活。酶是蛋白质结构,当蛋白质合成收到破坏的时候,酶的作用就会降低。可在香荚兰的种子中找到,也可以人工合成。



检测样本中的香兰素含量,方法还是比较多的。比如高效液相色谱(HPLC)法、液质联用(LC-MS)法、分光光度法等。


1.高效液相色谱(HPLC)法


HPLC测香兰素含量,样品制备是基础,操作过程比较关键。将样品研磨并充分混匀,准确称取20g,用200ml乙醇抽提16h,溶剂进行20-30次循环。抽提物转移到200ml容量瓶,用乙醇定容,用流动相稀释10倍。这个时候要注意的是,如果有大量乙醇进入流动相,基线噪声会比较大,影响最后的出峰,因此是用少量的乙醇定容。



色谱条件是检测必需的,每个参数都会影响到数据和结果。参考一下,C18的色谱柱,用紫外检测器,以甲醇:稀磷酸(25:75)为流动相,梯度洗脱,膜过滤,脱气。流速为1mL/min,根据实际情况调整进样量。


接着就是液相检测,可以用标准曲线的方法。根据浓度和峰面积之间的关系,建立标准曲线,计算回归方程和回收率。结合样品的检测色谱峰值和标准曲线,计算出样品中的香兰素含量。


2.液质联用(LC-MS)法



这是一种高灵敏度和高选择性的检测方法,适用于复杂样品中香兰素的检测。在需要更高检测灵敏度和选择性的场合,如低含量香兰素的检测中,LC-MS/MS法具有明显优势。


3.分光光度法


通过测量特定波长下的吸光度来定量分析香兰素的含量,操作简便,成本较低。


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