甘草酸是从甘草根中提取出来的一种有机化合物,分子式为C42H62O16,溶解于热水。可作甜味剂、调味剂、香味增强剂,广泛用于各类食品。

检测样本中的甘草酸含量,常用的方法是高效液相色谱(HPLC)法。

包括样品处理、色谱条件设置、标准曲线制作、样品测定和计算等过程。
1.样品处理
准确称量样本0.5g,放在50ml容量瓶中,加入流动相20ml,超声波提取20min,再用3000r/min离心5min,经过0.45um膜过滤,备用。
2.色谱条件设置
采用传统的、好用的C18色谱柱(250*4.6mm,5um),柱温25℃,紫外检测器,波长设置250nm,进样量10ul,流速1.0ml/min,乙腈-0.1%磷酸溶液(35:65)作为流动相。
3.标准曲线制作
标准品溶液,取甘草酸对照品适量,精密称量,用80%的甲醇稀释定容。使用标准品梯度稀释,进样到HPLC检测获取色谱峰数据。根据峰面积和对应浓度,制作标准曲线,计算回归方程和回收率。
4.样品测定和计算
将处理过的甘草酸溶液,在HPLC上进样测定,在计算机软件中读取色谱峰数据,结合标准曲线,计算出样品中的甘草酸含量。实验人员在操作过程中需戴塑胶手套和口罩,避免污染样品,同时操作记录要及时客观,确保数据准确。