什么是马来酸呢?它的化学名称是顺丁烯二酸,又称失水苹果酸。这种酸可以通过微生物发酵葡萄糖等碳源,在代谢的过程中产生。也可以以苯为原理,通过氧化和羧化反应得到。它的主要用途是:制造不饱和聚酯树脂,生产酒石酸、富马酸、琥珀酸、DL-苹果酸等化合物,作为染料助剂和油脂防腐剂等。在农药、医药、食品等方面,具有主要的应用意义。

检测样本中的马来酸含量,这里推荐的方法是高效液相色谱(HPLC)法。
HPLC检测马来酸,包括样品处理、色谱条件设置、标准曲线、样品测定、结果计算等过程。样品处理按照规定的步骤和标准方法操作,考验的是实验基本功底。在这个时候,要想一个问题,样品溶液应该用什么样的色谱柱来做。如果是蛋白、血样、生物制品等就不能用C18色谱柱。配制什么样的流动相,才能将马来酸从样品中分离出来。对于方法的摸索,就是要将马来酸真实的展示在色谱图的峰上。流动相在一定程度上决定了基线的稳定不稳定,最好在实验的时候现场配制,夏天使用缓冲液作为流动相的时候,不要过夜,防止细菌生长。使用之前,对溶液进行脱气处理,也是非常有必要的。

液相色谱的条件,每种情况下是不一样的,有标准的方法,也可以自己开发。比如,测马来酸含量,用C18色谱柱(硅胶为基质,柱长250mm,柱内径4.6mm,粒径5um),进样量5μL,紫外光检测器(波长214nm),流速1.0mL/min,磷酸水溶液-乙腈(85:15)。具体要看色谱出峰情况,如果峰出的好,便于对比和计算结果。下面要做的是马来酸的标准曲线,用标准品测定峰面积。
准确称量50mg 马来酸,溶于适量水,转移至 250mL容量瓶,用磷酸溶液稀释至刻度。移取上述溶液1mL ,置于 100mL 容量瓶,用磷酸溶液稀释至刻度,摇匀,经 0.45μm 滤膜过滤,再经超声波脱气处理。梯度进样,并测定其峰面积。以标准溶液浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,并计算回归方程。另外,还要考虑计算回收率。对样品也要进行测定,并根据测定峰面积,结合回归方程,计算出样品的马来酸含量。