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土壤谷氨酸脱氢酶活性检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-08-15 | 145 次浏览 | 分享到:

土壤谷氨酸脱氢酶(简称GDH)是一种存在土壤中的酶类物质,它的主要作用就是将谷氨酸氧化成α-酮戊二酸和氨,参与了氮代谢循环,可以促进植物对氮的吸收和利用。GDH存在于不同类型的土壤,比如农田、森林、草地等。它的活性是受pH、温度、湿度、有机质等因素的影响。GDH是土壤氮循环和微生物代谢的重要研究指标,检测方法主要有分光光度法。



首先,准备一定浓度的谷氨酸和NAD+溶液。将待测样品(谷氨酸脱氢酶)和NAD+溶液混合后,加入适量的缓冲液,使pH维持在酶活最佳的范围内。此时,加入谷氨酸溶液,混合后开始计时。在一定时间内,测定产生的NADH的吸光度变化。就是用分光光度法,测反应前后溶液的吸光度值。根据测定的数据,计算出谷氨酸脱氢酶的活性。



在测定的过程中,要设置一个对照组,用于排除其他物质对NADH吸光度的影响。为了确保实验结果的准确性,可以多做几个平行,求取平均值。


通过测定土壤中的谷氨酸脱氢酶,可以反映微生物对有机物的氧化分解能力,从而间接的判断土壤的肥力和生产力。


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