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植物中葫芦素B检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-08-14 | 154 次浏览 | 分享到:

葫芦素B是从葫芦科植物中分离出来的一类四环三萜类化合物,又被称为葫芦苦素B。它是葫芦素家族中含量最为丰富的成员,具有广泛的药理特性。葫芦素B难溶于水,但可以溶于甲醇、乙醇等有机溶剂。除了葫芦,还有很多植物都富含葫芦素B,比如瓜蒂、丝瓜、黄瓜等。



检测植物样本中的葫芦素B含量,常用的方法是高效液相色谱(HPLC)法。这并不是唯一的,也可以使用薄层色谱法。HPLC检测葫芦素B,包括样品处理、色谱条件设置、标准曲线、样品测定、数据处理等过程。


样品处理的过程,比如甜瓜蒂,先切成小片,用温水浸泡,溶解掉上面的油脂。接着,放入瓶中,加入适量的乙醇,搅拌。加入热水蒸发,降低稳定,使得甜瓜蒂中的有效成分完全溶解。用滤纸过滤,初步得到葫芦素B的提取液。



色谱条件的设置,是相对比较重要的。检测色谱图怎么样,都要靠这些参数的组合效果。比如,采用C18的色谱柱(250 mm ×4.6 mm,5.0μm),以乙腈--0.05mol.L-1K2HPO4(40:60)为流动相,在光电二级阵列管(DAD)检测器,228nm波长下测定。设置柱温25℃,流速为1.0ml/min。根据实际的情况,进行调整。每种设备,甚至实验条件不同,参数都会有改变。


标准曲线,要测定样品的含量,就要通过标准曲线来计算。标准曲线,就是拿标准品,梯度进样,测定对应的色谱峰。以色谱峰面积为纵坐标,以对应浓度为横坐标,制作出标准曲线来,并计算回归方程,回收率。通过精密度、稳定性、重复性实验,验证HPLC方法的准确性和可靠性。在样品测定的时候,可以连续进样6次并测定峰面积,


数据计算,对于后期的数据处理,要有判断依据。根据标准曲线的回归方程,可以计算出样品中含有的葫芦素B含量。


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