萝卜硫素主要存在于十字花科植物,如芥蓝、红萝卜、白菜、西兰花等蔬菜中,是常见的抗氧化剂。在植物体内是异硫氰酸盐经黑芥子酶的水解而生成的,分子式为C6H11NOS2,沸点368.2 ℃,分子量177.29。常温下呈黄色或无色液体,不溶于水,很容易溶解到甲醇、乙腈等有机溶剂中,在高温和碱性条件下容易分解。当植物组织被破坏的时候,才能水解得到萝卜硫素。在水解的过程中,容易受到pH、温度、水分等因素的影响,产量是比较少的。在医学领域,萝卜硫素具有重要的研究价值。

检测样品中含有萝卜硫素的方法,包括高效液相色谱(HPLC)法、气相色谱(GC)法、薄层色谱(TLC)法等。每种方法都有优点,根据需求来选择,应用范围有所不同,这里说一下HPLC的检测过程。
高效液相色谱(HPLC)法
HPLC是目前检测萝卜硫素最常见的方法之一,这种方法灵敏度高,准确度高,适合不同类型的样品。整个过程包括样品处理、仪器和试剂、色谱条件设置、检测和数据分析。其中,样品处理是很关键的。选择新鲜的萝卜作为实验材料,经过提取、离心、过滤等步骤获取目标产物待测液。上面说过,萝卜硫素对条件比较敏感,容易受到pH、温度、水分等因素的影响,因此提取过程要注意,尽可能避免影响。根据操作说明,去除杂质,以便于后续的色谱分析。

准确检测,还需要对HPLC足够的熟悉,才能将方法运用自如。色谱条件的设置,包括十八烷基(C18)色谱柱,乙醇或乙腈-水(20:80)为流动相,流速为1ml/min,检测波长为201 nm,紫外检测器,柱温35℃等。这些条件不是绝对的,而是根据实际情况,进行最优化的设计组合,从而获取理想的色谱峰,便于有效、准确的数据分析。
色谱检测的过程,它包括了标准曲线的制作,样品检测,数据计算等过程。要测定样品含量,就离不开标准曲线。对标准品进行梯度进样,以获得色谱峰的峰面积为纵坐标,以浓度为横坐标,制作标准曲线,并计算回归方程。同时,要计算出回收率。以同样的色谱条件,测定样品,在软件中记录色谱峰数据。根据标准品的曲线,计算出样品中的萝卜硫素的含量。
另外,还有用到GC和TLC的方法对样品中萝卜硫素进行分离、检测,根据实际情况来选择。