乌头碱是一种双酯类生物碱，分子中的酯键产生毒性。主要存在川乌、草乌、附子等植物中，溶于无水乙醇、乙醚和水。检测植物样本中的乌头碱含量，主要方法包括气相色谱（GC）法、高效液相色谱（HPLC）法、液质联用（LC-MS）法、紫外分光光度法等。这里简单的介绍一些，便于参考。

1.高效液相色谱（HPLC）法

HPLC检测样品中的生物碱，主要包括样品处理-色谱条件设置-进样-标准曲线制作-数据计算等过程。对于做实验的人来说，样品处理是很基础的，也是非常重要的。样品处理不好，后面做的再好，数据也是不真实的。样品处理包括方法和顺序，方法包括提取、洗涤等，按顺序操作，避免出现错误。同时，也要注意它具有毒性，做好防护和废液处理。提取后的乌头碱样品，进样到HPLC中测定色谱峰，对峰高或峰面积进行分析。

测定样品中乌头碱含量，避不开标准曲线的制作。标准曲线就是一把尺子，尺子做好了，测量结果就想对准确一些。使用乌头碱的标准品，梯度进样到HPLC中，根据对应浓度的峰面积，制作标准曲线，并计算回归方程。要计算样品中的乌头碱，还要考虑一个回收率的问题。就是标准品上标记的浓度，和通过色谱峰计算出来的浓度还是有一点差别的，将这个差别给计算出来，并回归到样品检测过程，才能得出想对准确的数据和结果。

这个过程看似是顺利的，其实还是有条件的。这个就是色谱条件，它之所以能够测很多种类的样品和指标，在于参数调节的灵活性。比如，色谱柱，流动相，进样量，进样速率，柱温等，通过最优化的组合设计，获取最佳的检测结果。如果有国标或药典可以参考，也是可以拿来用的，要考虑验证。

2.液质联用（LC-MS）法

LC-MS是在HPLC的分离基础上，连接了高灵敏度、高分辨率的质谱仪。质谱是可以对生物碱进行定性和定量分析，在电磁场的作用下，以荷质比为横坐标，离子强度为纵坐标。离子出现的频率或强度，是分析化合物结构的重要参数。这种方法适用于复杂样品中的乌头碱含量检测，同时，还能测出其代谢产物的信息。

除了以上的检测方法外，还有紫外分光光度法，即在特定波长下，测定乌头碱的含量。也是要先处理样品，制作标准曲线，然后计算数据。这种方法简单快捷，适合于初期的筛选和定量分析。