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生物胺含量检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-08-02 | 143 次浏览 | 分享到:

生物胺是一类具有生物活性,含有氨基的低分子量化合物,主要由微生物氨基酸脱羧酶的作用,当氨基酸脱掉羧基就剩下生物胺了。适量的生物胺能够增强代谢和免疫力,清除自由基;但是,如果过量的摄入就会引起头疼、呕吐等不良生理反应。



从结构上来区分,有脂肪族的腐胺、尸胺、精胺、亚精胺等,有芳香族的酪氨、苯乙胺,也有杂环族的组胺、色胺等。它们都在生物活性中起着重要的作用,比如调节DNA、RNA和蛋白质的合成,稳定生物膜等方面,都有突出的贡献。经研究发现,肉类、鱼类、豆制品、奶酪、酒类、泡菜、豆瓣酱中都有存在。


检测样本中生物胺含量,方法还是比较多的,比如高效液相色谱(HPLC)法、薄层色谱(TLC)法、电化学法等,根据不同的需求来选择方法。这里,简单介绍一下实验室常用的HPLC方法,仅供参考。



因为生物胺本身的紫外吸收比较低,而且不能发生荧光,需要对实验样本进行柱前或柱后衍生化处理,以提高检测灵敏度,比如丹磺酰氯、邻苯二甲醛等和生物胺反应,生成具有紫外吸收或荧光特性的衍生物。在此之前,要对样品进行前处理,用采用三氯乙酸、高氯酸等溶剂进行提取,用正己烷去除脂肪,三氯甲烷-正丁醇萃取净化。


HPLC检测生物胺,色谱条件一定要选择好,才能测得出来。C18的色谱柱,紫外的检测器(254nm),乙腈和水组成的流动相(梯度洗脱),流速1.5mL/min,柱温30℃。进样量根据实际情况来选择,不能太多了,太多的话压力不稳定,出峰也会有问题。这个方法可以采用内标法定量测定,对标准品测定是要计算回收率,并根据色谱图上的峰面积或峰高计算出生物胺的含量。


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