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植物独脚金内酯含量的测定
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-07-30 | 450 次浏览 | 分享到:

独脚金内酯是一种从棉花根系分泌物中分离出来的新型植物激素,它能够抑制独脚金的生长。那么,独脚金是什么呢?其实是一种杂草,农民不太喜欢它。它是吸取水稻、玉米等农作物的养分,并导致枯萎。虽然如此,它也是一味上好的中药材。独脚金内酯能够调控植物种子萌发、叶片衰老、根枝构型等生理功能,也和其他植物激素一起调节生长过程,



检测植物体内的独脚金内酯含量,方法有高效液相色谱(HPLC)法、液质联用(LC-MS)法、酶联免疫吸附(ELISA)法等。


1.高效液相色谱(HPLC)法


HPLC检测独脚金内酯含量,主要包括样品准备和处理,色谱条件的设置,数据分析和结果处理三个阶段。由于独脚金内酯主要是根系中提取的,如果是植物的样本,就的要求是新鲜的。在液氮中研磨成粉末,提取,离心,干燥溶解,过滤备用。中间的步骤,参考详细的检测规程和标准。液相方面,主要是对条件的设置,包括色谱柱、流动相、柱温、流速、进样量、检测器等。优化参数组合,以最佳的效果展示在色谱峰上,并通过软件记录并计算。采用标准曲线的方法,并计算回收率。完成对样品的检测,根据色谱峰的峰面积,结合标准曲线,计算出样品中的独脚金内酯含量。



2.酶联免疫吸附(ELISA)法


这里采用的ELISA是双抗体夹心法,往预先包被植物独脚金内酯捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的植物独脚金内酯呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),根据标准曲线,计算样品浓度。


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