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土壤蛋白酶活性测定方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-07-22 | 185 次浏览 | 分享到:

蛋白酶是对蛋白质的肽链进行水解的一类酶的总称,按降解方式的不同,分为内肽酶和端肽酶。内肽酶是将大分子的多肽链从中间给切断,形成很多的小的肽链。端肽酶可以分羧肽酶和氨肽酶,从多肽的游离羧基末端或游离氨基末端逐个的切除,最终生成氨基酸。



土壤中的蛋白酶分为碱性蛋白酶和酸性蛋白酶,能够水解各种蛋白质和肽类转化为氨基酸,因此,土壤蛋白酶的活性和土壤中氮含量有重要的关系。



检测土壤中的蛋白酶含量,主要的方法就是比色法。这是相对的简单的,如果需要更准确的方法,也是有的。检测原理:土壤蛋白酶在酸性条件下将酪蛋白水解为酪氨酸,络氨酸和福林酚在碱性条件下生产蓝色的化合物。这个蓝色的物质能够在680nm的波长处具有特别的吸收峰,在检测的过程中,需要使用带有底物酪蛋白作为对照,以扣除干扰的背景值。


比色法测定还是需要有标准曲线,梯度稀释标准品,并测定对应的吸光度值。对样品进行处理,测定吸光度值,求取平均值,并结合标准曲线计算出样品中的酸性蛋白酶含量。现在,也有专业的生化检测试剂盒,按照说明书操作就可以完成含量测定。


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