脯氨酸是一种环形的亚氨基酸，化学式为C5H9NO2，分子量为115.13，等电点为6.30，易溶于水。当脯氨酸进入肽链，就会形成4-羟脯氨酸，是动物胶原蛋白的重要成分。当植物在干旱、高温、低温、盐碱等逆境条件下，羟脯氨酸含量会明显提升，说明脯氨酸和植物逆境的适应性有关。这也是检测脯氨酸的重要意义，可以判断植物的生长规律和适应性。另外，脯氨酸是人体的非必需氨基酸。上面我们首先提到的物理和化学特性，是很有必要的。在检测脯氨酸含量的时候，就是要利用它的物理或化学特点，才能判断并测定出来。比如，在质谱定性定量分析的时候，要用到它的分子量。

检测样品中脯氨酸的含量，主要方法包括茚三酮显色法、水杨酸比色法、苯酰亚胺法、液质联用（LC-MS）法等。

分光光度法：

这种方法是利用化学试剂和脯氨酸在酸性条件下发生反应，生成具有明显颜色变化的物质，而且这个物质在一定时间内是稳定的，可以被分光光度计在特定的波长下测定，并记录数据。对标准品进行梯度稀释，并依次测定对应的吸光度值。根据吸光度值和浓度之间的关系，制作出标准曲线。对样品进行处理，并在同样的条件下测定吸光度值，重复几次，求取平均值。结合标准曲线和样品的测定值，可以计算出样品中的脯氨酸含量。常用的方法有茚三酮显色法、水杨酸法、苯酰亚胺法等。

LC-MS法：

LCMS可以测定样品中含量较低的脯氨酸，利用了HPLC的高效分离和质谱的高灵敏度，对样品碎片离子进行荷质比分析，进而对脯氨酸进行定性和定量检测。对样品处理，需要利用乙酸酐等试剂对脯氨酸进行衍生化处理。设置好质谱仪的电离源、分析模式、质谱分析范围等条件，调节实验参数，分析荷质比。