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植物组织淀粉含量检测
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-07-10 | 9 次浏览 | 分享到:

淀粉是一种高分子碳水化合物,是由葡萄糖分子聚合而成的。淀粉有直链淀粉,也有支链淀粉,其中直链淀粉是没有螺旋结构的。而支链淀粉是20-30个葡萄糖残基,以α-1,4-糖苷键首尾相连而成,在支链的地方是用α-1,6-糖苷键连接的。淀粉属于多聚葡萄糖,分子为(C6H10O5)n,其中n为不定数。



直链淀粉有几百个葡萄糖单元,支链淀粉有上千个葡萄糖单元。直链淀粉一端为非还原端,另外一端为还原端。而支链淀粉具有一个还原端和很多个非还原端。当用碘溶液检测的时候,直链淀粉会呈深蓝色,支链淀粉会呈紫红色。淀粉具有丰富的可再生资源、可降解性和可溶性,因此被广泛应用于食品、医药、化工等领域。



检测植物组织中的淀粉含量,一般可以采用比色法进行。检测原理:提取植物组织中的淀粉,淀粉是由葡萄糖残基组成的,当在酸性条件下的时候加热,可以水解为葡萄糖。然后,在硫酸的作用下,能够使得葡萄糖氧化脱水生成糖醛类化合物。此时,利用苯酚或蒽酮试剂和糖醛化合物发生显色反应,在分光光度计最佳波长处测定吸光度值。根据标准曲线,可以计算出样品中的淀粉含量。



这个实验考察的是基本功,准备必要的检测试剂,比如硫酸、蒽酮试剂等。准确称取标准淀粉,加入一定量的热蒸馏水,放入沸水浴中煮沸0.5h,冷却后用蒸馏水稀释至刻度,制成1mg/ml的标准溶液。在吸取5ml,加蒸馏水稀释定容到50ml,即0.1mg/ml标准溶液。


对标准淀粉溶液进行梯度稀释,可以取6个点,每个点2个重复,空白为蒸馏水代替。由于淀粉分为直链淀粉和支链淀粉,需要通过扫描的方式,分别确定直链淀粉和支链淀粉最佳检测波长。根据浓度关系,制作对应的标准曲线。


对样品进行处理:将提取可溶性糖之后的残渣,移入50ml容量瓶中,加20ml热蒸馏水,放入沸水浴中煮沸15min,再加9.2mol/L高氯酸2ml提取15min,冷却,混匀,过滤,定容。在分光光度计上最佳波长处,检测吸光度值,可以做几个重复,求取平均值。


淀粉水解的时候,在单糖残基上加了一个水分子。因此,在计算淀粉含量的时候,将得到的糖量x0.9,才能扣除掉加上的水分子量,以得到实际的淀粉含量。


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