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水飞蓟素含量测定
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-06-27 | 205 次浏览 | 分享到:

水飞蓟素是一种天然的黄酮木质素类化合物,它源于菊科植物水飞蓟。将水飞蓟的果实经过干燥,可以提取出来天然的活性物质,包括水飞蓟宾、水飞蓟宁、水飞蓟亭等。水飞蓟素是难溶于水的,但是可以轻松的溶解到丙酮、乙酸乙酯、甲酸乙醇等有机溶剂。水飞蓟素对肝细胞膜有稳定作用,避免某些对肝有毒性作用的物质进入细胞内部,同时它能够帮助细胞结构和蛋白酶的大量合成,有助于肝细胞的修复和再生。研究水飞蓟素,还是有比较大的科研价值的。



检测样品中的水飞蓟素的方法,还是有很多种的。其中比较常见的有分光光度法、高效液相色谱(HPLC)法、气相色谱(GC)法等。下面呢,简单的做一个介绍。如果要做实验,可以参考详细的操作规程或步骤。


1.分光光度法


这种方法相对比较简单,它是利用2,4-二硝基苯肼试剂和水飞蓟素发生化学反应,生成有颜色的化合物。这个产物的颜色和水飞蓟素的含量是呈一定的线性关系,为什么有这样的结论呢,是通过标准品的检测实验获得的,以有限次的实验来推演理想化的线性。同时,以线性关系来反过来计算样品中的化合物含量。打开分光光度计,选择特定的波长,这个波长可以通过一系列的波长检测同样的标准品,获得最大吸光度来确定。整个检测过程,包括试剂和设备的准备,样品的制备,标准曲线的制作,检测结果的计算和分析等。



2.高效液相色谱(HPLC)法


在分析实验室,HPLC是常用的一种检测仪器。对样品进行处理,在色谱柱中分离出水飞蓟素,通过流动相逐步的展示出来,最后在检测器的作用下获得对应的信号,通过模拟信号转化为检测数据。要知道的是,设备是固定的,但也是灵活的。选择理想的检测条件,是对方法的验证。如果方法不熟悉,肯定无法完成的。有了方法,也就是能够熟悉检测过程中的条件和要求,比如采用什么样的色谱柱,流动相的配比,柱温,进样量,进样速率,检测器类型,检测波长等。每个条件都可能影响到最终的检测数据和结果,就要通过不同条件的对比,实现最优化的组合。如果是一种新的方法,看起来是比较麻烦的。但对于成熟的方法,是直接拿来用的,能够快速获得高灵敏、高准确度的数据。通过对色谱峰高和峰面积的分析,计算出样品中的水飞蓟素含量。



除了以上的分光光度法和HPLC法,还有就是气相色谱法。测定水飞蓟提取物中的有机溶剂残留量,如己烷、乙醇和丙酮。这种方法通过测定色谱峰面积来进行定量分析。


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