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苦瓜皂苷含量检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-06-11 | 18 次浏览 | 分享到:

先说一下,苦瓜皂苷是从葫芦科植物的果实中提取出来的一种有机化合物,在苦瓜的种子和茎叶中也存在苦瓜皂苷。苦瓜中的皂苷主要是甾体类皂苷和三萜类皂苷,具有祛暑明目、解毒凉血等作用。根据苦瓜皂苷的动物实验,在一定程度上具有降低血糖、降低血浆中的胆固醇含量的作用。另外,苦瓜皂苷可以抑制葡萄糖-6-磷酸酶和果糖-1,6-二磷酸酶活性,从而抑制糖异生作用。增强细胞色素P450的活性,加速葡萄糖氧化。苦瓜皂苷对消化道内的α-糖苷酶和α-淀粉酶具有一定的抑制作用,降低小肠上皮细胞对葡萄糖的摄取。



常规的检测苦瓜皂苷含量的方法,包括紫外-可见光分光光度计或高效液相色谱仪(HPLC)等。


在测定苦瓜皂苷含量之前,需要对苦瓜样品进行处理。将新鲜的苦瓜进行干燥,去除水分后,粉碎成粉末,过筛后的样品经过石油醚脱脂。准确的称量处理后的样品,这个数据是要计算含量用的。比如加2.5g放到250mL的碘量瓶中,加入一定量的乙醇溶液,过滤后加入正丁醇溶液萃取,分离出正丁醇,再进行浓缩,真空干燥得到苦瓜皂苷。



用分光光度法测定苦瓜皂苷含量,就要用到标准曲线了。标准品参考用的是人参皂苷Rg1的标准品,称取2mg,加入无水乙醇溶解定容至4mL,摇匀,作为对照品溶液。精密吸取0.05,0.10,0.15,0.20,0.25,0.30mL,分别到具塞试管中,加入新配制的5%的香草醛-冰乙酸溶液0.2mL,高氯酸0.8mL。在60℃的水浴中加热15min,流水冷却,加入冰乙酸5mL,摇匀,在15min内在分光光度计上548nm的波长处测定吸光度值。以对照品的浓度为横坐标,以吸光度值为纵坐标,制作标准曲线,得到回归方程。



和标准曲线相同的条件下,测定样品的吸光度值,可以取无水乙醇作为空白对照,可以做几个重复,求取平均值。根据标准曲线,计算出样品中含有的苦瓜皂苷的含量。


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