黄酮类化合物属于植物的次生代谢产物,在植物界分布很广,大多数情况下和糖苷键结合成苷类或碳糖基,有的还以游离形式存在。黄酮的药用作用实在太多了,比如预防心脑血管疾病等。黄酮类化合物在植物体内的形成,是由葡萄糖经过莽草酸途径和乙酸-丙二酸途径,生成羟基桂皮酸和三个分子的乙酸,然后合成查尔酮,再衍生出各类的黄酮类化合物。

测定槐花中的总黄酮含量,其基本原理是:利用溶液中的铝离子和总黄酮中的羟基或甲氧基发生络合作用,在强酸的条件下形成稳定的有色络合物。最后,利用紫外可见分光光度计测定产物的吸光度,并使用标准曲线计算出槐花中的总黄酮含量。

标准曲线的测定,分别称取对照品1,2,3,4,5,6mL,各自放在25mL容量瓶中,加水到6.0mL,加亚硝酸盐溶液,混匀后加入硝酸铝溶液,再加入氢氧化钠溶液,最后加水定容到刻度。以空白试剂为对照,在分光光度计500nm波长下测定吸光度。以测定的吸光度值为纵坐标,以对照品对应浓度为横坐标,绘制成标准曲线,并计算出回归方程。
对样品进行处理,将槐花粉碎,加入甲醇,超声30min后过滤,精密吸取10mL,加水定容至100mL的容量瓶中备用。检测的方法,和标准品测定吸光度的步骤相似,根据测定的吸光度值,结合标准曲线,计算出样品中的总黄酮含量。
注意事项:样品精确称量,避免出现误差。在强酸的条件下进行反应,要注意安全,避免出现腐蚀。