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植物硝酸盐含量的测定
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-05-27 | 270 次浏览 | 分享到:

自然界中的硝酸盐主要是固氮菌在固氮的时候形成的,也有时候,电闪雷鸣会让空气中的氮气和氧气结合形成氮氧化合物,溶于雨水并和地面上的矿物质发生反应生成硝酸盐。硝酸盐可以给植物充足的氮肥,氮元素不仅是氨基酸和蛋白质的主要成分,还可以合成叶绿素,促进光合作用。因此,如果植物在生长的过程中缺少了氮元素,叶子就会出现变黄枯萎的现象。



检测植物体内的硝酸盐含量,常用比色法检测。当然,为了更准确的检测,也有用到光谱法,色谱法,电化学法等。


比色法检测的原理是:在浓酸的条件下,硝酸根离子和水杨酸发生反应,生成硝基水杨酸。生成的硝基水杨酸,在碱性的条件下呈黄色,最大吸收峰波长410nm。在一定的浓度范围内,颜色和含量是呈正比的,就根据这个线性关系,采用比色法测定标准曲线。对样品进行处理,并在相同的条件下反应并上机检测,测定的结果根据标准曲线,计算出植物样品中的硝酸盐含量。



因此,这里需要准备的溶液就有:硝氮-N标准溶液,5%水杨酸-硫酸溶液,8%氢氧化钠溶液。下面,一个比较关键的步骤就是制作标准曲线。分别吸取一定量的硝氮-N标准溶液,分7个梯度稀释定容,制备成10ug/mL,20ug/mL,40ug/mL,60ug/mL,80ug/mL,100ug/mL,120ug/mL的标准溶液。分别吸取以上的标准溶液,在分光光度计上测定,以0.1mL去离子水做空白对照。每个都加入0.4mL的5%水杨酸-硫酸溶液,摇匀,在室温下20min,再加入8%NaOH溶液9.5mL,摇匀后冷却至室温。在410nm的波长下,测定吸光度。以标准溶液浓度为横坐标,以吸光度值为纵坐标,绘制成标准曲线并计算回归方程。


有了标准曲线,就要对样品进行处理和测定。我们的样品是植物,将植物组织剪碎混匀,精确称量2-3g,放入刻度试管中,加入10mL的去离子水,放在沸水浴中提取30min,之后用自来水冷却,将提取液过滤,定容到25mL的刻度。按照上面标准品处理的过程和步骤,依次加入水杨酸,冷却,NaOH溶液,并在分光光度计上测定其吸光度。根据标准曲线,计算出样品中的硝酸盐含量。


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