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植物花色苷含量检测
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-05-24 | 238 次浏览 | 分享到:

花色苷是花色素和糖以糖苷键的方式结合而成的一种化合物,它存在于植物的花、茎、叶、果实和根部的细胞液中。有了花色苷的存在,能够让植物呈现不同的颜色,比如红色、紫色、紫红色或兰色等。花色苷是一种类黄酮,能够清除自由基,保护视力,已被应用于食品、保健品、化妆品、医药等行业。花青素也是一种花色苷,只是它不含有糖基,它是一种水溶性的色素,可以随着细胞酸碱度而发生颜色的变化。



检测植物组织中的花色苷含量,一般可以用到pH示差法、高效液相色谱(HPLC)法和质谱(MS)法。


1.pH示差法


用这种方法检测花色苷含量,就先准备缓冲液,第一、pH1.0的缓冲液,1.86g的氯化钾,加980mL的蒸馏水,用盐酸调节pH到1.0,定容1000mL。第二、pH4.5缓冲液,用32.81g的无水醋酸钠,加980mL的蒸馏水,用盐酸调pH值到4.5,定容至1000mL。



下面就要进行检测了,用pH1.0,pH4.5的缓冲液,将样品中的花色苷稀释一定的倍数,平衡15min。然后,分别让这2个不同的pH的溶液,在可见分光光度计的510nm和700nm的波长处,测定吸光度,以蒸馏水为空白对照。测定的吸光度A=(A510-A700)pH1.0-(A510-A700)pH4.5,花色苷的浓度就是检测的吸光度Ax稀释倍数x矢车菊-3-葡萄糖苷的分子量x消光系数。


2.液相色谱质谱(LC-MS)法


样品处理:将待测的花色苷样品进行处理,粉碎成粉末后,加入适量的甲醇或乙醇进行提取,在离心机上分离,并收集上清液备用。

LC-MS检测:将上清液进样到HPLC进行分离,以梯度洗脱的方法。通过分离后的花色苷,在质谱检测器中,获得分子量和结构,可以更准确、更灵敏的检测出花色苷的含量。这种方法,需要昂贵的检测设备和成熟的技术人员,才能有效的完成检测。


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