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测定山楂中槲皮素的含量的方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-05-07 | 13 次浏览 | 分享到:

山楂是蔷薇科植物,果实是一味中药,也可以做成食品。山楂果中包含了很多种生物成分,包括山楂素、槲皮素、山奈酚、芦丁等成分,其中槲皮素是我们今天说的重点。



槲皮素是一种黄酮醇类化合物,广泛的分布在植物的茎皮、花、叶、芽、种子、果实中。它有多广泛呢,据不完全统计,将近有100多种药用植物中均含有槲皮素。其中,在荞麦的杆和叶中,以及山楂中含量都比较高的,当然在蔬菜和水果中也含有很多。


槲皮素在植物中是以糖苷的形式存在,可以通过水解的方式来获得。常用的制备方法有提取分离、酸水解法、酶转化法等。那么,槲皮素到底有什么用呢?根据细胞和动物模型生物活性评估,它具有抗氧化,抑制自由基的形成的作用。槲皮素在人体中的代谢机制,目前还不是很清楚,需要进一步的去探索和研究。



检测样品中槲皮素含量的方法,有高效液相色谱(HPLC)法,也有紫外可见光谱法、荧光光谱法。这里我们稍微说一下高效液相色谱法,它的主要步骤和注意事项。


设备和试剂的准备:主要仪器就是HPLC,包括色谱柱、检测器等。另外,还需要有槲皮素的标准品,山楂样品,甲醇等。检测的过程中,采用甲醇-磷酸溶液(45:55)为流动相,检测波长360nm(根据最优化调试确定)。


检测过程:先要对标准品进行处理,精密称量槲皮素,用甲醇稀释定容,摇匀。对于山楂样品来说,如果是干燥的话,就需要先将它粉碎过筛,精密称量,然后加入浓硫酸、甲醇,在水浴加热回流。检测过程最为重要的是就是做标准曲线,是利用标准品溶液上机进样,设定5-6个梯度体积,在HPLC上以最佳的条件进行检测,测定到对应的峰高和峰面积。以进样量为横坐标,以峰面积为纵坐标,计算出槲皮素标准品在实验中的回归方程。同时,可以做精密度、稳定性、重复性、回收率实验。


检测结果:按外标法测定样品中的槲皮素峰值,计算出槲皮素含量。


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