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小檗碱高效液相色谱检测
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-04-19 | 11 次浏览 | 分享到:

小蘖碱,是从黄连中提取出来的一种生物碱,也称为黄连素。小蘖碱具有抗菌作用,也就是不容易被细菌侵蚀。检测样品中的小蘖碱含量,具有重要的药用价值。



检测小蘖碱含量,常用的方法就是高效液相色谱(HPLC)法。使用到的仪器设备包括:液相色谱仪、电子天平、移液器、容量瓶、超声波清洗器等。样品采用植物的茎或叶,以自然干燥为好。HPLC检测,要用到流动相,因此试剂采用色谱纯的乙腈,分析纯的磷酸二氢钠,还有最为重要的盐酸小蘖碱的标准品。


色谱条件(仅供参考):C18的色谱柱,乙腈-磷酸二氢钠标准溶液(25:75),1.0ml/min的流速,柱温20℃,检测器波长调至345nm。其实,这个条件的设置也是经过方法验证的。如果你的样品需要重新验证,从而获得更准确的数据,也是非常有必要的。但需要考虑到各种影响因素,选择最佳的匹配条件。



标准曲线的制作,盐酸小蘖碱的标准品是需要经过处理才能上机测定的。对标准品的处理方法不尽相同,最终都是为了准确测定出峰值和峰面积。标准品的配置是采用甲醇进行梯度稀释6个点,上机测定,获得对应的信号值。根据峰高或峰面积和浓度的关系,模拟标准曲线,计算出回归方程,统计回收率和精密度。对样品进行粉碎处理,溶解,超声提取,获得相应的溶液待测。按同样的条件,进样测定其峰面积或峰高。根据标准曲线,计算出样品中的小蘖碱含量。


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