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马钱苷含量检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-04-12 | 19 次浏览 | 分享到:

马钱苷属环烯醚萜苷类,主要是从山茱萸中提取出来,也是它的主要功能成分。有良好的抗炎,抗菌作用,作为常用的中成药物原料添加。此外还有镇咳,祛痰等作用。马钱苷也是六味地黄的主要成分,它的含量多少直接关系到药物作用的强弱。因此,对马钱苷进行研究,具有重要的健康意义。对它的理解,不能只停留在宏观上的作用和功能,而需要从分子层次上去探索作用机制。了解它在植物体内的作用机制,更深一步的应用在科研或医学研究上。



检测样品中的马钱苷含量,现在采用比较多的就是高效液相色谱(HPLC)法。它能够准确可靠的测定出马钱苷的含量,主要是依据标准品作为参照。


1.样品处理


要检测马钱苷的含量,就需要对样品进行处理。处理的意义,是将马钱苷从固态的植物中提取出来,这个提取的过程不敢保证全部,就目前的科学手段,也具有一定的参考价值。将样品粉碎并过筛,将粉末在甲醇中浸泡,超声提取,离心沉淀,收取上清液备用。这个操作过程,具体的参数和要求,需要在做的时候参考标准和方法。


2.色谱条件设置


对化合物进行检测,就要先对色谱条件进行设置。这里的设置,并不是随意的。而是通过方法验证,选择检测出马钱苷的最佳的条件。有的是直接参考方法,有的是要对条件进行验证的。主要表现在色谱柱和检测器的选择,柱温的设置,流速的调节,进样的确定等方面。



3.标准曲线制作及样品检测


对马钱苷标准品进行梯度稀释,在液相色谱仪上进样检测,设置好最佳的波长,通过检测器获得马钱苷的吸收峰高和峰面积。根据浓度和峰面积,计算出标准曲线。对样品进行检测,读取峰值和峰面积,并根据标准曲线,来计算出样品中的马钱苷含量。


这是通过已知的检测点绘制成一条连续的曲线,因为不知道样品中的马钱苷浓度在这个曲线的哪个位置,就需要建立峰值和浓度的线性关系。这个关系是通过部分的检测点,得到的理论的值。因此,这里不能完全保证是多少。其中,是有不确定性的。也包括在实验过程中,消除检测的误差,增强重复性。


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