次黄嘌呤核苷酸（IMP）是生物体内的一种嘌呤核苷酸，是由次黄嘌呤、核糖和磷酸基团组成的。在体内起着重要的作用，如核酸合成、能量传递、细胞信号调控等。次黄嘌呤核苷酸（IMP）是腺嘌呤核苷酸（AMP）和鸟嘌呤核苷酸（GMP）的共同前体，IMP是经过磷酸戊糖途径和多步的酶促反应而合成的，可被水解为次黄苷和磷酸，进一步分解为尿酸排出体外。

检测方法：高效液相色谱（HPLC）或液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）。

1.样品处理

精确称取0.2000g样品，放入2mL 离心管，再加 1mL 2.5%高氯酸水溶液，放置振荡器混匀 1min，低温超声20min，13000r/min 离心 20min，取上清液过 0.45μm滤膜，待液相色谱测定。

2.色谱条件

C18色谱柱，250mm长，4.6mm内径，5um粒径，柱温30℃；以甲醇-水（2:98）为流动相，等度洗脱，流速1ml/min。紫外检测器，波长254nm。进样量10uL。有的用的色谱柱不一样，对应的流动相也会有所差别。比如，用ODS-100V（250*4.6mm，5μm）的色谱柱，0.035mol/L 磷酸二氢钠（pH=6.8）等度洗脱。

3.标准曲线

将次黄嘌呤核苷酸（IMP）的标准品用甲醇溶解，配制成标准母液。并进行一系列的梯度稀释，比如0.5mg/L，1.5mg/L，10mg/L，50mg/L，100mg/L，尽可能的覆盖到样品溶液的浓度范围。进样到HPLC中，测出色谱峰，记录峰的保留时间，对峰面积进行积分。在表格中用趋势图可拟合出标准曲线，得到回归方程，相关系数r2要大于0.999并接近于1。有的需要加标回收率，稳定性等考虑。

4.含量计算

有了标准曲线，通过测定样品溶液的色谱峰，保留时间能识别出色谱峰，并对面积进行积分，代入到回归方程，可计算出样品溶液中的IMP的含量。