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苍术素含量测定方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2025-06-20 | 45 次浏览 | 分享到:
苍术素是一种重要的甾体化合物,主要来源于菊科植物茅苍术或北苍术的干燥根茎。分子式为C13H10O,分子量:182.2,可溶于甲醇、乙醇等有机溶剂。苍术素具有降血糖、利尿、促进胃排空、抗炎等生理活性。

苍术素是一种重要的甾体化合物,主要来源于菊科植物茅苍术或北苍术的干燥根茎。分子式为C13H10O,分子量:182.2,可溶于甲醇、乙醇等有机溶剂。苍术素具有降血糖、利尿、促进胃排空、抗炎等生理活性。


检测方法,包括高效液相色谱(HPLC),气相色谱(GC)等。


1.HPLC


样品处理:将样本加入液氮,研磨成粉末的状态。精确称量大于0.3g放入到15ml的离心管中,加入5ml的甲醇,充分振荡1min。在室温的条件下,超声30min。结束后,用4000r/min的离心机进行离心10min。转移上清液到新的离心管中,向残渣中加入5ml的甲醇,重复一次合并上清并定容10mL。上清液0.22um膜过滤,待测。


色谱条件:C18的色谱柱,250mm长,4.6mm内径,5um粒径;柱温25-30℃,VWD检测器,波长200nm;以甲醇和水为流动相,等度洗脱。流速1ml/min,进样量20uL。


标准曲线:精密称取一定量各个标准品于5mL棕色容量瓶中,然后加入适量甲醇超声溶解后用甲醇定容至刻度线,摇匀、使之成为2mg/mL的单标储备液,-20℃保存。梯度稀释6个浓度点,尽可能的覆盖到样本溶液的浓度范围。依次进样到HPLC,测出色谱峰,记录保留时间,对标准品的峰面积进行积分,在表格中拟合出标准曲线,得到回归方程。


样品测定:对样品的测定方法,类似于标准品。进样到HPLC中,出现的峰不一定有标准峰那么漂亮。因为样本中化合物的种类和含量是不确定的,但要确保方法是科学的、准确的、有效的。对测出来的色谱峰面积进行积分,并代入到回归方程,计算出样品溶液中的苍术素含量。


2.GC


采用氢火焰离子检测器(FID),适当的毛细管色谱柱,柱温:150℃,进样器温度:280℃,氮气流速:30ml/min,氢气流速:30ml/min,程序升温。


对照品溶液的配制分别精密称取苍术素适量,加乙醚分别制成每毫升约含0.01mg的溶液,作为对照品溶液。梯度稀释6个浓度点,尽可能覆盖到样品溶液的浓度范围。进样到气相色谱,根据色谱峰面积和对应浓度,绘制标准曲线,得到回归方程。


样品溶液的制备精密称取样品粉末(过40目筛)100mg,置于10ml具塞试管中,加乙醚5.0ml,室温超声波提取10min,室温静置,上清液作为样品溶液。


测定精密吸取样品溶液及对照品溶液各2μl,进样测定出色谱图。色谱峰面积,代入到回归方程,得到样品溶液中的苍术素含量。


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