油菜素甾醇是一种高生理活性的甾体激素，在植物中的含量比较低，最早来源于油菜的花粉中。油菜素甾醇在植物生长过程中起着重要的作用，比如促进细胞膜洗脱质子泵对氢离子的泵出，调节细胞壁松弛，加快生长速度，抑制生长素氧化酶的活性等。近几十年来，它被确定为新的植物激素。目前我们常见的植物激素有生长素，细胞分裂素，赤霉素，脱落酸，乙烯，茉莉酸，水杨酸，独脚金内酯等。油菜素甾醇在植物体内合成途径比较多，比如C-6氧化，C22氧化。化学式为C28H50O，分子量为402.69，溶于有机溶剂如乙醇，氯仿和乙酸乙酯，但不溶于水和酸碱。

检测植物中的油菜素甾醇的含量，一般采用高效液相色谱（HPLC），气相色谱（GC），液相色谱串联质谱（LC-MS/MS），气相色谱质谱联用（GC-MS）等方法。以HPLC为例，简单的介绍一下测定流程。

1.样品处理

如果是植物样品，常常将样品进行粉碎研磨处理，并加入乙酸乙酯溶剂，超声处理，过滤待测。乙酸乙酯的纯度和体积都是有要求的，一般可以参考相关的文献资料，记住超声波的功率，频率和时间，在多少温度下进行。冷却后用乙酸乙酯补充失去的重量，进行0.22um的微孔膜过滤。

2.色谱条件

C18的色谱柱，250mm长，4.6mm的内径，5um的粒径，柱温30℃；以乙腈和水为流动相，梯度洗脱，流速1ml/min，紫外检测器，波长208nm，进样量10-20ul，仅供参考。

3.绘制标准曲线

采用油菜素甾醇的标准品，先配制出母液出来，然后进行成倍的稀释5-7个点，确保在检测限的有效范围内，并覆盖到样本浓度的可能范围。依次进样到HPLC中，记录标准溶液的出峰保留时间和峰高或峰面积。对峰面积进行积分处理，和峰面积对应的标准溶液浓度对应拟合出标准曲线，得到回归方程，相关系数R2大于0.999，接近于1。

4.含量计算

将样品溶液进样到HPLC中，看出峰的情况。如果出峰正常，通过保留时间可以识别出目标峰的位置，并对它进行积分处理。代入到回归方程，计算出样品溶液中的油菜素甾醇含量。