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黄芪皂苷测定方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2025-05-13 | 12 次浏览 | 分享到:
黄芪皂苷是从中药材黄芪中提取出来的一种活性成分,具有多种药理作用,比如增强免疫力,抗疲劳,抗氧化,抗炎等。黄芪皂苷的主要是由糖苷和皂苷两部分组成,其中糖苷包括葡萄糖,鼠李糖等,皂苷部分包括甾体或三萜类化合物。目前从黄芪中分离出来的皂苷有很多种,主要有黄芪皂苷I,II,III,IV等。黄芪皂苷在植物中的含量比较低,在实验室检测过程中一般会采用高效液相色谱(HPLC)或液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)等方法测定含量。

黄芪皂苷是从中药材黄芪中提取出来的一种活性成分,具有多种药理作用,比如增强免疫力,抗疲劳,抗氧化,抗炎等。黄芪皂苷的主要是由糖苷和皂苷两部分组成,其中糖苷包括葡萄糖,鼠李糖等,皂苷部分包括甾体或三萜类化合物。目前从黄芪中分离出来的皂苷有很多种,主要有黄芪皂苷I,II,III,IV等。黄芪皂苷在植物中的含量比较低,在实验室检测过程中一般会采用高效液相色谱(HPLC)或液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)等方法测定含量。


1.样品处理


通过70%的甲醇进行回流提取,水饱和正丁醇萃取黄芪中的皂苷成分。



2.色谱条件


采用C18的色谱柱,250mmx4.6mm,5um,柱温25-30℃;以乙腈和水,或0.3%甲酸和乙腈,梯度洗脱,流速为1.0ml/min,进样量10-20uL。下面就是检测器了,我看有不同种类的检测器。有的用示差检测器(RID),也有蒸发光散射检测器(ELSD),还有质谱检测器(MS)。



3.标准曲线


计算含量,用外标法的话就是标准曲线。采用黄芪皂苷的一种类型的标准品,用有机溶剂进行溶解和稀释,通常是采用流动相中的有机溶剂。这样的话,标准品进入到流动相中就不会发生突然的变化,从而导致色谱峰出现不规则。对每个参数的调整,都需要开发或验证,从而确定最佳的色谱条件,获得相对准确的有效的色谱峰。梯度稀释,形成5-7个浓度点,进样到HPLC中,测定出对应的色谱峰。当然,如果是质谱,就是被打碎的具有质荷比(m/z)的离子峰。对峰面积进行积分,在表格中对应到它的标准溶液浓度,可以绘制出标准曲线,得到回归方程,相关系数需要大于0.999。


4.含量计算


标准品已经走过一遍了,现在可以上机测样品溶液。样品出来的峰可能会比较多,并没有标品那么纯净。但是,根据色谱柱的特点,在标准品色谱图中找到它的保留时间,就能对应的分析出来样品色谱图中的位置,识别出目标峰。对峰面积进行手动或自动积分,代入到回归方程,计算出对应黄芪皂苷的含量。


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