当肌肉活动的时候，就会消耗肝糖元；当肝糖消耗完的时候，就要消耗组织组织了。中性的脂肪组织会被分解为游离脂肪酸，被当做能源来使用。游离脂肪酸存在于人的脂质内，大致可分为胆固醇，中性脂肪，磷脂质等3种。血清中的游离脂肪酸和脂类代谢，糖代谢，内分泌等功能有关。

检测样本中的游离脂肪酸含量，实验室一般采用气相色谱（GC）或滴定法完成。由于滴定法测定的结果没有那么精准，这里着重用气相色谱法来讲述一下检测过程。

1.样品前处理

在样品中加入二氯甲烷-甲醇溶液（V/V=2:1）匀浆，4000r/min离心5min，分别取下层溶液和上层溶液于具塞试管中，加入20%的0.88% KCl 溶液后混匀，过夜分层后取下层液体真空干燥，所得物质即为粗脂肪。加入酮－甲醇溶液（V/V=2:1）和阴离子交换树脂于恒温振荡器中震荡2h 后去除溶液，用丙酮－甲醇溶液洗5 次( 共用20mL) ，最后在通风橱中用氮气将交换树脂吹干。

甲酯化：加5mL 0.5mol /L 的氢氧化钠甲醇溶液混匀后连接回流装置。在100℃水浴中加热回流5min，然后加3mL 三氟化硼－ 10% 甲醇溶液反应5min，最后加入2mL 正己烷回流萃取2min，取出冷凝装置将回流瓶冷却至室温后加NaCl 饱和溶液混合，并将其移入具塞试管中，反复冲洗回流瓶3 次将洗液一并倒入具塞试管中静置。待分层后吸取上层溶液( 正己烷层) 约lmL 于样品瓶中，于4℃下保存。

2.色谱条件

采用SP－2560的色谱柱，柱初始温度60℃，以8℃ /min 升温至180℃，1.5℃ /min 升温至240℃，保持3min; 气化室温度250℃，载气: N2; 柱流速:1mL /min; 分流比: 30∶1; 进样量1μL。采用氢火焰离子检测器（FID）。

3.标准曲线

一般情况下，为了能够更准确的计算出样品中的游离脂肪酸含量。采用外标法，也就是标准曲线，即回归方程来计算。标准曲线，一般是采用5-7个点，通常是6个梯度浓度。对脂肪酸甲酯的标准品进行溶解和稀释，并在有效的检测范围内。横坐标是每个稀释的浓度点，纵坐标是对应色谱峰面积的积分，通过表格函数的形式就可以获得。

4.含量计算

有了标准曲线，只要测出来样品中的脂肪酸甲酯的峰面积，就可以通过回归方程，计算出含量了。这个时候，通过出峰时间，可以判断出样品中的对应的峰。对面积进行手动或自动积分，并计算出样品中的脂肪酸甲酯含量。