维生素a主要来源于深绿色蔬菜，水果和动物性食物等。它是一种脂溶性的维生素，化学式为C20H30O，分子量286.45，紫外线能氧化它。其实，维生素a并非一种，它还包含了维生素a1，维生素a2。维生素a维持了人体正常的生理代谢和技能，比如维持视力，促进生长发育，增强免疫力等。维生素a不是单一的化合物，而是一系列包括视黄醇，视黄醛，视黄酸等。从结构上来看，它是由20个碳组成的，具有1个β-紫萝酮环，1个类异戊二烯的侧链。在C15的位置上，结合了羟基，或醛基，或羧酸基等。

测定样品中的维生素a含量，方法有比较多。实验室里面，主要用的是高效液相色谱（HPLC）法、酶联免疫吸附（ELISA）法、比色法等。

以HPLC为例

它是利用色谱柱的吸附分配功能，在流动相的冲洗作用下，不断地分离出来，在检测器中形成一个个的峰值。因此，这里就用到维生素a的物理和化学性质，同时要对仪器的性能有足够的了解，才能知道用什么样的色谱柱，柱温设置多少，流动相的配制比例等更准确，有效的分离出来。其实，这个过程中，还有很多注意的问题。比如，样品的处理过程。每个方法都有前后顺序的，常用到粉碎，超声，萃取，过滤等。之前我们说过，维生素a是脂溶性的，就要溶解在有机溶剂中。同时，它对紫外光是比较敏感的。

色谱条件：比如C18的色谱柱，250mm长，4.6mm内径，5um粒径。以正己烷-异丙醇（997:3）为流动相，流速1ml/min。紫外检测器，波长325nm，进样量10uL。

标准曲线：使用外标法测，将标准品用流动相或有机溶剂溶解，并进行梯度的稀释5-7个浓度点。最低的点，确保在检测器有效范围内，比如5-10倍的信噪比。根据设定好的色谱条件，测定各个浓度的标准溶液，出来了色谱峰。对面积进行积分，对应各自的标准溶液浓度，在表格上可以用函数来做标准曲线，得到回归方程。回归方程的相关系数r2＞0.999，需要考虑回收率，稳定性等参数。

样品测定：使用hplc测样品的色谱峰，根据标准品的出峰时间，确定样品的位置，并对峰面积进行积分。根据回归方程，可以计算出维生素a的含量。