吡哆醇是一种有机物，也称为维生素B6。化学式为C8H11O3N，分子量169.18，能溶于水和乙醇。它能参与多种生物化学反应，比如，氨基酸的代谢，脂肪的代谢等。吡哆醇广泛的存在米糠，蔬菜，蜜糖等食物中，是一种水溶性的维生素。它在生物体内会转变为吡哆醛，吡哆醛又会变成吡哆胺。吡哆醇和蛋白代谢也是有关系的，如果在蛋白代谢过程中没有了吡哆醇，蛋白质转变为碳水化合物和脂肪的通路就会堵塞。另外，吡哆醇对血红蛋白的合成也是必需的。

检测方法有多种，常见的有高效液相色谱（HPLC）法，酶联免疫吸附（ELISA）法。

1.HPLC

将植物的样品打碎，研磨，过筛。称取一定量到试管中，加入甲醇，水和磷酸混合溶液，超声，离心，过滤。这个过程，是对样品进行前处理。提取的大致流程是相似的，根据每个样品的特点不同，会有不同的方法，参数会变化的。

色谱条件，是比较关键的。我们通常来说，就是方法开发。HPLC测的过程中，针对不同的物质，分离和检测的参数都不一样。结合的是什么，化合物基础的物理和化学特性。比如，吡哆醇检测，采用C18的色谱柱，柱温为室温。这里是的室温，并不是随便的室温，根据实际情况可以调整的。0.04%戊烷磺酸钠溶液和甲醇为流动相，流速为1.0ml/min。紫外检测器，波长为280-290nm，需要进行验证。一般的进样量为10-20uL，根据出峰情况进行调整，确保能够获得有效的色谱峰。

大多数科研检测，会采用外标法，也就是标准曲线来计算含量。也就是对标准品进行溶解，成倍的稀释5-7个浓度点。这个标准溶液的浓度点是已知的，使用有效的色谱条件，测定出它们的色谱峰。对峰面积进行积分处理，可以手动，也可以自动。以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，描点绘制曲线。回归方程，相关系数R2＞0.999。稀释5-7个点，并不是随意的，最低点一般是检出限的5倍左右，

因为样品进样到HPLC，也会有色谱峰。条件是相同的，出来的色谱峰积分后，使用面积和回归方程，就能计算出样品中吡哆醇的含量。这个过程，还要考虑到样品的稀释倍数。

2.酶联免疫吸附（ELISA）法

通过酶标记的抗体与维生素B6结合，形成酶标-抗体-维生素B6复合物，然后加入底物使酶催化底物发生颜色反应，通过测定颜色反应的强度来推算维生素B6的含量。

检测过程：样品处理-包被抗体-洗涤-封闭，温育-加入标准品和样品-加入检测抗体-加入底物-反应终止-数据分析。