L-苹果酸是一种天然存在的有机酸，化学式为C4H6O5。在自然界中的水果中比较多，比如苹果，葡萄，樱桃等。L型是苹果酸的一种立体异构体，是一种手性结构，具有特定的旋光性。L-苹果酸溶于水和乙醇，是一种酸性较强的有机酸。可以作为食品调节剂或酸味剂，用于食品工业，医药工业，日用化工等领域。从目前的科学研究情况来看，L-苹果酸被认为是一种安全，无毒，无害的有机酸。

使用高效液相色谱（HPLC）法测L-苹果酸的含量，需要经过一系列的步骤。包括样品的前处理，hplc色谱参数设置，色谱峰和数据处理，标准曲线，含量计算等。

1.前处理

将植物样品进行粉碎，磨成粉，过筛。精确称取4g，放置在15mL的离心管中，加入5mL的水，4℃超声提取30min。放在4℃的冰箱静置2h，取4000r/min离心10min，重复上述的操作两次，用水定容到10mL，混匀，过滤膜。

2.色谱条件

采用常规的C18色谱柱，5um，250*4.6mm，柱温30℃。VWD检测器，波长210nm。0.1%磷酸水和甲醇为流动相，等度洗脱，流速为1ml/min。进样量为10-20ul，仅供参考。

3.标准曲线

这是一种外标法，使用L-苹果酸的标准品，进行溶解和定容，并记录溶液浓度。此时，需要对标准溶液进行梯度，成倍的稀释，至少6个浓度点。稀释的浓度点，要覆盖在检测器有效的范围内。根据测定出来的色谱峰，对峰面积进行积分。对应到标准溶液的浓度，可以绘制出标准曲线，得到回归方程，相关系数r2＞0.999。

4.样品测定

有时候，为了确保样品检测的准确性，也有先测样品，后测标准品的。在上述的色谱条件下，测定样品，看出峰情况。对色谱峰面积进行积分，可以用自动的，也有手动的。使用标准曲线的回归方程，可以计算出样品中L-苹果酸的含量。为了确保准确性，要考虑稳定性，回收率等。