鸟嘌呤的化学式为C5H5N5O,分子量151.126,广泛存在于动、植物界。鸟嘌呤是一种嘌呤的衍生物,具有共轭双键,是DNA和RNA的主要碱基之一,也是鸟苷酸的组成部分。从化学结构上来说,它是由一个嘧啶环和一个咪唑环稠合成的。鸟嘌呤具有多种异构体,存在于脱氧核糖核酸和核糖核酸中。鸟嘌呤的苯环上存在孤对电子,参与配位反应。鸟嘌呤主要用于科学研究,以及医药中间体。

检测样品中鸟嘌呤含量的方法,主要有高效液相色谱(HPLC)法、液相质谱联用(LC-MS)法、酶联免疫吸附(ELISA)法等。
1.高效液相色谱(HPLC)法
HPLC测定的过程,包括了前处理,色谱条件,色谱峰,原始数据,标准曲线,含量计算。
提取的方法,并非那么容易。将植物组织的样品,进行粉碎,研磨,加入适量的有机溶剂,比如甲醇来提取鸟嘌呤。过程中呢,还会用到振荡和超声,从而提高提取的效率。过滤和离心,能够让样品从粗糙的溶液中,更一步的去除杂质,获得相对清澈的液体成分。一般情况下,成了液体是不是就可以直接测了呢?其实,也不一定的。这个要看情况的。通常情况下,经过了离心和膜过滤,也需要进行干燥处理,然后进一步的溶解,利于后续的HPLC测定。用什么溶剂溶解,这是比较重要的,一般选择流动相中的溶剂,比如乙腈或水。
色谱条件:常用的C18反相色谱柱,柱温25-30℃;流动相有用乙酸-乙腈-甲醇的,也有用磷酸二氢钾的,流速1.0ml/min,进样量10-20ul;紫外检测器,波长待定,根据实际情况,调整对应的参数,让峰出的更完善,更有效,结果会更准确的。
标准曲线:一般情况下,HPLC测含量,常用到内标和外标法。而标准曲线,就是外标法,常规的情况下使用。将标准品,按要求进行溶解,成倍的,梯度的稀释,至少6个点的浓度。按设置好的参数进行测定,记录色谱峰,对面积进行积分。以标准品的浓度为横坐标,对应色谱峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,得到回归方程。
根据回归方程,是可以得到含量的。但是,为了更准确的得到计算结果,需要确保相关系数r2>0.999,重复性要符合要求。不能忽略的是回收率,稀释倍数。

2.液相质谱联用(LC-MS)法
LC-MS结合了液相出色的分离能力,加上质谱的定性定量分析,就可以将鸟嘌呤从本质上进行确定含量。它适合于复杂样品中的鸟嘌呤含量测定,甚至还能对代谢物也能精确分析。是不是很厉害啊,虽然有优点,却需要对方法有充分的了解,设备比较贵。