四环素是抗生素的一种有机化合物，分子式为C22H24N2O8，分子量444.45，其结构均含并四苯基本骨架，微溶于水和低级醇。四环素的衍生物还有金霉素和土霉素，均属于酸碱两性化合物。它是由放线菌产生的一种广谱抗菌素，溶于乙醇和丙酮，在空气中稳定，易吸收水分，受阳光照射会变色。药物残留对环境是有危害的，测抗生素残留，有重要的科研和应用价值。

抗生素的检测方法有多种，这里介绍一种测四环素含量的，用的是高效液相色谱（HPLC）法。

在检测样品中四环素含量的过程中，有两个方面是比较重要的。一、样品前处理过程，如果前处理步骤不明确，或处理不恰当，很可能会造成结果的偏差，甚至测试不出来。这个考察的是对化合物性质的考察，以及整个操作步骤的作用整合。二、就是HPLC的色谱条件，色谱条件主要包括色谱柱类型、柱温、流动相配比、流速、进样量、检测器、波长等，每个参数的变化，都会影响到最终的检测结果，这一系列的色谱条件，通力合作，各得其所，才能达到完美的色谱峰。

前处理包括研磨，加热，离心，溶剂提取，净化等步骤，具体操作方法根据样品的类型和测试要求而定。仅供参考的色谱条件，比如C18的色谱柱，柱温为30℃，以甲醇和0.02mol/L的磷酸二氢钾溶液为流动相，流速一般为1.0ml/min，紫外检测器，波长280nm，进样量设置为10ul。色谱条件并不是固定的，有的时候会根据设备和实验环境的变化，进行适当的改变。总之，色谱条件就是随遇而安，尽可能的调整到最佳状态。有的时候，需要根据之前的方法验证，有的时候需要重新开发。

定量检测四环素，就要用到标准曲线了。标准曲线，就是将标准品进行适当的溶解，梯度稀释至少6个点，尽可能的覆盖到样品溶液的浓度。依据上述的色谱条件，将标准溶液依次进样测定。根据出峰的情况，对色谱峰面积积分。以色谱峰面积为纵坐标，对应的浓度为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程，保持相关系数r2＞0.999，重复性RSD＜2%，其他方法学参数符合应用要求。对样品进行适当的稀释，以和标准品相同的色谱条件，上机测色谱峰。根据回归方程，计算样品中的四环素浓度。需要注意的是回收率和稀释倍数，从而确定最终的含量。