维生素B12，其实就是钴胺素，是一种含有三价钴的多环系化合物。它是唯一的含金属元素的维生素，溶于水，难溶于乙醇，不溶于丙酮、氯仿和乙醚。pH值在4.5-5.0的条件下最为稳定，强酸碱或预热都会有一定程度的破坏。高等植物不能合成维生素B12，是微生物合成的。维生素B12有两种辅酶：谷氨酰胺和甲基谷氨酰胺。在钴啉环平面上方，钴离子和5,6-二甲基苯基咪唑的N-3相连，在平面下方和5-脱氧腺苷的C5相连。

维生素B12广泛存在动物食品中，在植物的大豆以及一些草药中也含有维生素B12。能够贮藏在肝脏，人体需求量极少。食物中的维生素B12和蛋白质结合，进入人体消化道，在胃酸、胃蛋白酶和胰蛋白酶的作用下，维生素B12会被释放出来，并和胃壁细胞分泌的一种糖蛋白内因子结合。主要从尿液排出，部分从胆汁排出。

实验室检测方法，主要有高效液相色谱（HPLC）法和比色法。

以HPLC为例，需要样品提取-色谱条件设置-标准曲线-样品测定-结果计算等步骤，仅供参考。

提取：称取4-10g样品于50ml离心管中，加10-15ml水，混匀。超声提取10min后，再以4000r/min离心5min。吸取上清液于另一个50ml离心管中，对残渣按照上述步骤，每次加入10ml水，重复两次，合并提取液于50ml离心管中。

色谱条件：C18色谱柱，以乙腈和0.025%三氟乙酸（pH=2.6）为流动相，梯度洗脱。或以乙腈-磷酸盐缓冲液（称取磷酸二氢钾6.8g，加水1000ml使其溶解，用磷酸调节pH值至3.0±0.05） 为流动相；流速为1.0ml/min；柱温为30℃；检测波长为361nm；进样体积10-20μl。可以根据实际情况，进行适当的调整。

标准曲线：使用VB12的标准品，进行溶解，定容，梯度稀释6个浓度点作为标准工作液。以上述的色谱条件，进样到HPLC中，测定不同浓度下的色谱峰。对峰面积进行积分，以峰面积为纵坐标，对应标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程和回收率。相关系数r2＞0.999。

样品测定：提取后的样品，要知道稀释了多少倍，为了能够准确的计算。以标准曲线相同的色谱条件，对样品进样测定。根据测定出来的色谱峰面积，和回归方程的关系，可以计算出样品中的维生素B12的含量。这里的含量，还要考虑到回收率和稀释倍数，进一步计算出样品中的VB12含量。