土壤脲酶是一种能水解尿素生成氨和碳酸的酶，存在于大多数细菌、真菌和高等植物中。其活性与土壤微生物数量、有机质含量、全氮和速效磷含量呈正相关。常用的测定方法是靛酚蓝比色法，通过测定氨根离子的含量变化来推算脲酶活性。实验步骤包括样品采集和处理、显色反应及比色测定，最终通过标准曲线计算出土壤中脲酶的活性。
土壤脲酶是线型酰胺的C—N键(非肽)的水解酶，能酶促土中尿素水解成氨和碳酸。它存在于大多数的细菌、真菌和高等植物中。脲酶的活性，和土壤中的微生物数量、有机质含量、全氮和速效磷的含量呈正相关。
测定土壤中脲酶活性，常用的方法是靛酚蓝比色法。
1.基本原理：
脲酶能够分解尿素，释放铵根离子。通过测定反应体系中的氨根离子的含量变化，可以推算出脲酶的活性，也就是脲酶的作用能力。在强碱性介质中，氨根离子和次氯酸盐、苯酚反应，生成水溶性的靛酚蓝。这个靛酚蓝在波长为578nm的时候，具有特征吸收峰，用分光光度计测定其吸光度值。颜色的深浅和溶液中氨含量是呈正比的，通过标准曲线的方法，可以计算出土壤中脲酶活力的大小。
2.实验步骤
样品采集和处理：选择具有代表性的土壤样品，进行风干、研磨和过筛处理。称取0.1g的土样，放入离心管中，加入甲苯抑制土壤微生物活性，加入尿素溶液和柠檬酸缓冲液。摇匀后，放入37℃的恒温箱中，培养24h。
显色反应：培养结束后，取1mL的滤液，放入容量瓶中。加入蒸馏水、苯酚钠和次氯酸钠溶液，充分摇匀，放置20min，使得显色完成。
比色测定：使用分光光度计，在波长为578nm的地方，将显色液放入1cm比色皿中测定，以空白试剂为对照。对标准品溶液进行6个点的稀释，并测定对应的吸光度值，可以多测几次求取平均值。以标准溶液的氨含量为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。对样品进行适当的稀释，并上机测定吸光度值，可以测3次重复，求取平均值。结合标准曲线的回归方程，可以计算出样品中的脲酶活性。
