线粒体柠檬酸是三羧酸循环中的重要产物，检测其含量的方法主要有紫外分光光度法和高效液相色谱（HPLC）法。紫外分光光度法通过柠檬酸裂解酶生成α-酮酸，再与苯肼反应生成α-酮酸苯腙，利用其在330nm处的特征吸收峰测定吸光度变化，制作标准曲线计算柠檬酸含量。HPLC法则利用色谱柱的吸附功能，通过梯度洗脱分离化合物，选择适当的色谱条件，测定标准品和样品的色谱峰面积，绘制标准曲线并计算柠檬酸含量，需确保线性关系良好（r2＞0.999），稳定性和重复性符合要求。
线粒体柠檬酸是三羧酸循环中的重要产物之一，是由乙酰辅酶A和草酰乙酸缩合而成的，检测线粒体柠檬酸含量的方法，有紫外分光光度法和高效液相色谱（HPLC）法。
1.紫外分光光度法
柠檬酸在柠檬酸裂解酶的作用下，生成α-酮酸（草酰乙酸），在弱酸条件下，α-酮酸进一步和笨肼反应，生成相应的α-酮酸苯腙。α-酮酸苯腙在330nm处具有特征吸收峰，可以用分光光度计在这个波长下，测定吸光度的变化程度。制作标准曲线，根据回归方程和样品的测定吸光度值变化，可以计算出来线粒体柠檬酸的含量。
2.高效液相色谱（HPLC）法
HPLC测柠檬酸含量，是常见一种精确测定方法。它利用了色谱柱的吸附功能，根据塔板数的不同，将化合物逐步分开。选择适当的流动相配比，梯度洗脱，可以让化合物逐步分离出来，从而选择出柠檬酸的色谱峰。首先，这里需要确定的是色谱条件。也就是说，需要通过方法开发，从而获得最佳的检测结果。除了上面说的色谱柱，流动相，还有柱温，流速，进样量，检测器，波长等参数。
根据标准曲线的方法，就要使用到标准品。对标准品进行梯度稀释，获得至少6个点的不同浓度的标准溶液。以设置好的色谱条件，上机测定对应的色谱峰，记录数据。根据色谱峰面积和浓度的关系，绘制出标准曲线，计算回归方程和回收率。确保有良好的线性关系，r2＞0.999，稳定性和重复性要符合要求。
对样品的处理，需要考虑提取的问题。有对应的方法，按步骤操作，注意细节就行。另外，对提取出来的柠檬酸样品，进行适当的稀释。以同样的色谱条件，上机测定，获得对应的色谱峰。根据色谱峰面积，和标准曲线的回归方程，可以计算出样品中的柠檬酸含量，要考虑回收率和稀释倍数。
