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酒石酸含量检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-10-10 | 198 次浏览 | 分享到:
酒石酸是一种广泛存在于植物中的羧酸,主要存在于葡萄和罗望子中,是葡萄酒中的主要有机酸之一。它具有抗氧化剂和酸味增强剂的作用,同时也是重要的药物原料。酒石酸具有两种相同的手性碳原子,存在三种立体异构体,其中天然存在的酒石酸是右旋体。检测植物样本中的酒石酸含量常用高效液相色谱(HPLC)法,通过标准溶液的制备和标准曲线的绘制,可以准确计算出样品中的酒石酸含量。

酒石酸是一种羧酸,又名2,3-二羟基丁二酸,化学式为C4H6O6。它广泛存在于植物中,比如葡萄、罗望子。酒石酸是葡萄酒中的主要有机酸之一,在食品中可以用作抗氧化剂,可以让食物具有酸味。另外,还是重要的药物原料。酒石酸具有2个相同的手性碳原子,有3种立体异物体。天然存在的酒石酸是右旋体,以游离的钾盐、钙盐、镁盐等形式存在植物体,特别是果实和树叶中。



检测植物样本中的酒石酸含量,常用的方法有高效液相色谱(HPLC)法。


试剂和设备:80%乙醇,酒石酸标准品,磷酸二氢铵(分析纯)、蒸馏水。高效液相色谱仪,C18色谱柱,超声波,抽滤泵,容量瓶,滤膜(0.45um),锥形瓶,电子天平,水浴锅,蒸发皿,电炉,烧杯等。



色谱条件:C18色谱柱,柱温30℃;0.01mol/mL的磷酸二氢铵溶液,流速1ml/min;紫外检测器,波长210nm。


标准溶液制备:精密称取0.25g酒石酸标准品,用蒸馏水溶解于烧杯中,转移到100ml的容量瓶中,用蒸馏水定容到刻度。然后,梯度稀释,分别配制成2.5ug/mL,2.0ug/mL,1.5ug/mL,1.0ug/mL,0.8ug/mL,0.5ug/mL的标准品溶液,并用0.45um的滤膜过滤,超声处理。


标准曲线的制作:按上述的色谱条件,将标准品溶液进样测定,在软件中记录色谱峰和数据。以色谱峰面积为纵坐标,对应的标准溶液浓度为横坐标,绘制标准曲线,计算回归方程和回收率。确保有良好的线性关系。


样品制备和测定,用80%的乙醇对样品进行萃取处理,并进行适当的稀释。以上述的色谱条件下,测定并记录样品的色谱峰。以峰面积和标准品的回归方程,可以计算出样品中的酒石酸含量。


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