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辣椒红素含量检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-09-26 | 347 次浏览 | 分享到:
辣椒红素是从成熟红辣椒中提取的类胡萝卜素,分子式为C40H56O3,易溶于多种有机溶剂,具有辣椒香气味,广泛应用于食品工业。其检测方法包括高效液相色谱法和紫外-可见分光光度法。高效液相色谱法使用C18色谱柱,通过梯度洗脱和荧光检测器测定辣椒红素含量;紫外-可见分光光度法则通过测量特定波长下的吸光度来定量分析。

辣椒红素属于类胡萝卜素,是从成熟的红辣椒果实中提取出来的四萜类有机物,分子式为C40H56O3。易溶于植物油和丙酮、三氯甲烷、乙醚,溶于乙醇,不溶于甘油和水。它的结构上含有11个共轭双键,6位有1个共轭酮基和1个环戊烷环。具有辣椒香气味,在食品工业上,辣椒红素应用广泛,比如肉类、糕点、色拉、罐头、饮料等。在紫外光下易褪色,遇到Fe3+、Cu2+、Co2+可促使其褪色,遇Pb3+可形成沉淀。



检测样本中辣椒红素的含量,常见的方法是高效液相色谱(HPLC)法、紫外-可见分光光度法等。


1.高效液相色谱法


色谱条件:C18的色谱柱,柱温40℃;以1%冰乙酸-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1.5ml/min;荧光检测器,激发波长280nm,发射波长325nm。


样品制备:称取0.5g样品放入50ml离心管中,加入20ml的甲醇,涡旋混匀1min,在4000r/min的离心5min,取上清微孔过滤,作为样品溶液备用。



标准曲线制作:将标准品进行梯度稀释6个点,并在上述色谱条件下,进样到HPLC中测定色谱图。以色谱峰面积为纵坐标,对应标准溶液浓度为横坐标,制作标准曲线,计算回归方程和回收率。确保良好的线性关系,相对标准偏差在要求的范围内。


样品含量测定:将样品溶液稀释到适合的倍数,在上述的色谱条件下,进样测定色谱图。根据色谱峰面积,和标准曲线的回归方程,可以计算出样品中的辣椒红素含量。


2.紫外-可见分光光度法


将处理后的样品溶液放入分光光度计中,选择适当的波长进行测量。辣椒红素在特定波长下具有特征吸收峰,通过测量这个吸收峰的吸光度,可以定量分析样品中的辣椒红素含量。


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