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异亮氨酸含量检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-07-24 | 152 次浏览 | 分享到:

异亮氨酸是人体必需氨基酸之一,属于脂肪族中性氨基酸,更是一种具有旋光性的有机物。异亮氨酸是一种支链氨基酸,能够很快分解转化为葡萄糖,防止肌肉组织的受损。当人体在锻炼运动的时候,会消耗一定的能量和热量,肌肉组织会不断发生机械重复活动。当肌肉摩擦运动的时候,有能量被消耗,甚至不足够维持肌肉运动的时候,就会产生肌肉受损。而异亮氨酸能够快速分解成葡萄糖,补充足够的能量。异亮氨酸的来源有很多,比如糙米、豆类、坚果、全麦等,缺乏的话就会出现低血糖症状,过量的话会出现皮炎、腹泻等问题。



检测样品中异亮氨酸含量的方法,主要包括高效液相色谱(HPLC)法、氨基酸分析法、液质联用(LC-MS)法等。


1.高效液相色谱(HPLC)法


HPLC测异亮氨酸,就是利用色谱柱将样品中的化合物分离,并在流动相的作用下洗脱出来,在检测器内获取对应的信号值,并在软件中记录色谱图的峰值和峰面积。根据标准曲线或内标法,计算出样品中的异亮氨酸含量。对于检测效果怎么样,其实很大程度上取决于色谱条件。比如,采用C18的色谱柱,三氟乙酸-乙腈为流动相,流速0.8mL/min,进样量20uL,ELSD检测器等。懂技术的就能学起来容易,做起来难,能做好真的需要耐心钻研。这种方法准确率高,灵敏度也高,被广泛用在氨基酸检测。



2.液质联用(LC-MS)法


LC-MS是结合了液相色谱和质谱的优点,在HPLC内进行高效分离,并利用质谱检测器对化合物进行定性和定量测定。能够从复杂的、微量的样品中将异亮氨酸进行分离,并准确、高效的检测出来,根据荷质比,推断化合物的分子结构和丰度。选择适宜的检测参数,是LCMS检测的关键。


另外,还可以根据情况适用毛细管电泳法,即利用电场力使带电的氨基酸在毛细管中迁移,根据迁移时间的不同进行分离和检测。


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