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脂肪酸液质检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-07-17 | 157 次浏览 | 分享到:

脂肪酸是一个大的概念,从分子层次上来说,它是有碳、氢、氧三种元素组成的化合物,为生物体提供了生命的能量。从碳链长度来分,有短链脂肪酸、中链脂肪酸、长链脂肪酸。按饱和程度来看,还可以分为饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸。



对于脂肪酸的检测,方法还是比较多的,这里介绍的是液质联用(LC-MS)。主要步骤包括:样品预处理,液相色谱分离,质谱检测。


样品预处理为什么放在首位呢,样品处理不好,结果肯定不准确了。对于脂肪酸来说,通常采用甲酯化或乙酯化的方法,将脂肪酸转化为可溶于有机溶剂的衍生物。因为流动相采用的是有机溶剂,就要让脂肪酸成分充分的溶解进去,才能进行分离和洗脱,否则很容易沉淀堵塞。通过液相色谱仪的色谱柱进行分离,色谱柱中有固定相和流动相,化合物在固定相中并分配系数不同,停留时间也有不同。分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关,也与温度、压力有关。亲和吸附比较强的,洗脱时间要长一些;亲和吸附比较弱的,很快就会被洗脱。于是,在色谱图上就按时间为顺序,出现一个一个的峰图。



要到检测数据的时候,接入的时候质谱检测器。质谱检测器可以测定出样品中脂肪酸的分子量、分子结构和相对丰度等信息。能够更准确的对某种脂肪酸进行定性,更有效地分析含量。将化合物离子化后,进入质谱的电磁场中,根据化合物的荷质比不同进行分离,并在对应的位置集中,模拟信号,形成图谱和数据。质谱仪中垂直方向是磁场,水平方向是电场,带电的离子在电场中加速,当荷质比越小,奔跑半径就越大。如果再小,就接收不到信号了。因此,要调节电场和磁场,能够将有效化合物出现在对应的位置上。


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