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麦角甾醇含量测定方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-07-04 | 938 次浏览 | 分享到:

麦角甾醇是什么呢?其实,它还有一个名字叫麦角固醇。这是通过微生物发酵合成而来的,不仅具有独特的生理作用,比如抗菌、抗炎、抗氧化等,还被广泛的用在药物开发领域。麦角甾醇是真菌细胞膜的重要组成部分,结构稳定,专一性强。怎么说呢?如果要测真菌的生物量,可以通过测麦角甾醇的含量来代表了。那么,麦角甾醇在细胞中起到什么作用呢?它能够确保细胞富有活力,保持膜结合蛋白的活性,细胞物质代谢的过程中可以起到运输大队长的作用。



检测样本中麦角甾醇的含量,常用的方法有气相色谱(GC)法、紫外分光光度法、高效液相色谱(HPLC)法等。HPLC是检测麦角甾醇的常用方法,不同的样品采用的方法也是一点差别的。液相检测的方法,其实就是确定检测过程的条件,最终得到科学准确的、有理有据的数据,分析出结果令人可信。



工欲善其事,必先利其器,设备和试剂的准备是不可缺少的。其中,要测定的指标一定需要有对照品,也就是参考标准。比如,精密称量麦角甾醇对照品2.5mg,放置于5mL的容量瓶中,加入甲醇溶解并定容,制备成0.5mg/mL的标准溶液。对样品的处理,也是非常关键的。它是基础性的,考验的是实验的基本功。如果样品提取没有准确,测定过程有多精密,结果也未必真实。精确称量5g植物样品,加入石油醚,在60℃-90℃条件下索氏提取6h,提取液水浴蒸干,甲醇溶解,定容到5mL容量瓶中,就是样品溶液了。


检测数据怎么样,就要看实验条件了。HPLC检测采用常规的C18色谱柱,250mmx4.6mm,5um;流动相为甲醇,柱温25℃,检测波长283nm,流速1.0ml/min,进样量为10uL。上机检测,测定标准品和样品的色谱峰。对标准品进行梯度浓度进样,对检测出来的色谱峰进行数据分析,绘制标准曲线,求得回归方程。如果是新的方法,需要考察精密度、重复性、回收率等。最终,计算出样品中的麦角甾醇含量。


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