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植物根系活力检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-07-02 | 193 次浏览 | 分享到:

植物的根系集合了吸收和合成两大功能,它的生长情况和活力水平直接决定了上面植株的营养状况和产量。根系活力就是植物根系吸收水分和营养的能力,以及根系对外部环境条件的反应程度。在根系的微观世界中,也发生了一系列的氧化、呼吸、合成等过程。



常用的检测方法是比色法,这里简单介绍两种权作参考,如果有需要进一步的了解或测定,需要有专业的说明和操作步骤,以便于准确测定结果。


氯化三苯基四氮挫(TTC)法


检测原理:TTC其实是一种氧化还原色素,它溶于水为无色溶液,但是还原后就会生成红色的、不溶于水的三苯甲腙。生成的三苯甲腙是比较稳定的,不会被空气中的氧自动氧化。植物根系中的脱氢酶能够引起TTC发生还原反应,它可以广泛的作为酶检测的氢受体。因此,可以用TTC还原量来表示脱氢酶活力,并作为根系活力的指标。



检测过程包括标准曲线的制作、样品处理、样品检测和计算等步骤。


标准曲线的制作:取一杯0.4%TTC溶液0.2ml放入10ml的量杯中,加入些许的Na2SO4粉摇匀后立即产生红色的甲月替,再用乙酸乙酯定容至刻度,摇匀。最后分别取这个溶液0.25ml,0.50ml,1.00ml,1.50ml,2.00ml到10ml的容量瓶中,用乙酸乙酯定容至刻度。于是,就得到了含甲月替的25ug,50ug,100ug,150ug,200ug的标准比色系列,以空白做对照,在485nm波长下测定吸光度,制作标准曲线了。


样品处理和检测:称取植物根系样品,放入到烧杯中,加入0.4%TTC溶液和磷酸缓冲液的等量混合液10ml,把根充分浸泡在溶液内,在37℃保持1-3个小时。之后,加入1mol/L的硫酸,停止反应。把根取出来,吸干水分,放入研钵内,同时加入乙酸乙酯和少量的石英砂,在里面磨啊磨。提取出里面的甲月替,转移到试管中,用乙酸乙酯洗涤几次,最后再用乙酸乙酯定容。在分光光度计485nm的波长处,检测它的吸光度值,以空白作为参比,根据读取的数据,结合标准曲线,可以计算出四氮挫的还原量。还没完呢,最后要计算根系活力的。四氮挫还原强度=四氮挫还原量/(根系重量x反应时间)。


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