铁皮石斛具有悠久的历史,是一味很好的中草药。石斛里面有很多有效成分,比如生物碱、多糖、氨基酸、酚类等。每一类物质成分都有对应的功能,也是靠通力配合才能共同完成对应的作用机制,比如酚类能抗衰老,多糖能增强免疫力等。石斛多糖具有清除自由基,提高抗氧化酶活性,抑制脂质过氧化,保护生物膜等,具有较强的抗氧化能力。《神农本草经》中就有记载,具有“轻身延年”的作用。

检测铁皮石斛的方法有很多种,包括酚硫酸法,硫酸蒽酮法等。这些方法有一个共同的特点,就是利用石斛中的多糖和特定试剂发生反应,通过显色物产生颜色。颜色的深浅和多糖的浓度是成线性的关系的,于是乎,就用分光光度计测定标准品的吸光度。吸光度值是可以读取数据的,浓度是已知的,通过几个点的测定就可以制作出标准曲线了。这个曲线就像标准线谱一样,依靠它,通过样品的吸光度值,才能得到对应的、理论上的样品多糖浓度。
1.酚硫酸法
这是一种常见的检测多糖含量的方法,当溶液中有酚存在的时候,多糖能够在浓硫酸的作用下产生蓝色或紫色的反应产物。准备一个研钵,将铁皮石斛研碎,并称取备用。用0.1,0.2,0.4,0.6,0.8g/L的多糖标准溶液,分别用酚和浓硫酸进行处理。分别测定对应浓度下的吸光度值,制作成标准曲线。将样品也加入酚和浓硫酸,保持一段有效的反应时间,并测定它的吸光度值,可以多测几次求取平均值。根据标准曲线,计算出样品中的多糖含量。

2.硫酸蒽酮比色法
石斛多糖在浓硫酸的作用下,会被水解成单糖分子,并迅速的脱水形成糠醛。糠醛就有意思了,它能够和蒽酮试剂发生缩合反应,产生糠醛衍生物。这个糠醛衍生物是有颜色的,正常情况下是呈蓝绿色的,而且能够在一定时间内稳定的。现在做检测,如果溶液的颜色不稳定,很容易测不准的。颜色越稳定,浓度就越均匀。如果颜色很快就变了,那测得的吸光度就和浓度之间的关系发生变化了。这个变化暂且说是怎么样的,但和理想的状态下是有一点差别的。但是,这个差别是有很难发现的。
因此,在使用比色法检测多糖浓度的时候,需要注意颜色的变化时间。有的是试剂盒的形式,说明书上会标出来注意事项,在多少分钟内完成测定吸光度值。采用分光光度计,在624nm波长处测定吸光度值。同样,采用0.1,0.2,0.4,0.6,0.8g/L的多糖标准溶液,测定对应吸光度值,并绘制标准曲线。对样品也进行同样的操作,并测定吸光度值。根据标准曲线,是可以计算出样品中多糖的浓度的。