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亮氨酸高效液相色谱检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-06-17 | 290 次浏览 | 分享到:

亮氨酸是一种支链氨基酸,来源于糙米,豆类,肉类,坚果,大豆粉和全麦等,人体不能合成,只能通过食物才能获得。它常用于蛋白质合成和能量代谢,可以提高生长激素的产量,促进植物的生长。



测定样品中亮氨酸含量,常用的方法是高效液相色谱法。它用于分离和测定化学物质的含量,基本上包括准备样品、色谱柱选择、流动相配制、样品进样、柱温控制、梯度洗脱、检测器选择、数据分析等。


对于色谱检测条件来说,是相对比较重要的。有标准的方法,也有需要验证的。参考的条件有:C18的反相色谱柱,醋酸-磷酸盐:乙腈的流动相,流速1.0ml/min,检测波长214nm,进样量5ul,柱温25-30℃等。每种氨基酸的方法可能会有不同,具体会有适当的调整。



将样品中的杂质去除,使用乙腈等溶剂提取亮氨酸。如果用甲醇-水作为流动相,可以添加适量的有机酸或缓冲溶液调节。常用的检测器是紫外-可见光谱检测器。亮氨酸在214nm波长处有最大吸收峰,外标法检测。利用色谱软件进行数据采集和分析,计算亮氨酸的峰面积,并根据标准曲线得出亮氨酸的含量。


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