加盟热线:
400-075-0108

www.sinobestbio.com

优选生物
当前位置:
新闻资讯
NEWS CENTER
植物油菜素内酯含量检测
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-06-12 | 392 次浏览 | 分享到:

植物的油菜素内脂是一种甾醇类的天然化合物,在植物的花粉、种子、茎和叶等部位都有发现。它对植物的生长发育起着重要的调节作用,比如促进植物生长,增加农作物的产量,提供农作物的抗病、抗旱、抗盐、抗湿、抗热、抗寒、减少除草剂对农作物的伤害等。在被子植物如扁豆、水稻、玉米、荞麦、牵牛花、向日葵、赤杨、柑橘等都存在油菜素内酯,在花粉和未成熟的种子中含量丰富,在茎中居中,在叶和果实中含量比较低。



检测植物中油菜素内酯含量的方法有高效液相色谱(HPLC)法、液质联用(LC-MS)法、酶联免疫(ELISA)法。


1.高效液相色谱(HPLC)法


色谱条件的准备是做好实验的关键,每个参数的调整都关系到最终的结果。色谱柱的选择,流动相的配置,柱温和检测波长的设置,通过紫外检测器获取信号,并通过软件得到色谱峰和数据。对样品的处理要注意的,能从样品中提取多少,每个步骤都不能忽略。不要把精力都放在检测的过程上,因为检测的时候已经是在既定的条件了,能够改变的就是在样品处理的时候,尽可能的获得准确的油菜素内酯。要测定样品的化合物含量,就会用到标准曲线。标准曲线是标准品的浓度和对应色谱峰或峰面积的对应关系,或是回归方程。它反应了浓度和色谱值的关系,在同样的条件下,通过测定样品的色谱值,可以还原出来浓度,也就是样品中所含有的油菜素内酯含量。



2.液质联用(LC-MS)法


上面是HPLC的检测方法,具有灵敏度高,分离效果好、重现性强等特点。但为了获得更为准确的数据,就科研方面来说,是能够用到质谱检测器的。质谱检测器,是一种基于化合物分子量的定量检测方法。它是在液相分离的基础上,进入质谱分析。这种方法灵敏度更高,选择性很强,结果更准确。



3.酶联免疫(ELISA)法


ELISA测植物体内的油菜素内酯,是通过双抗体夹心法测定的。经过纯化的植物油菜素内酯抗体包被微孔板,制作出固相抗体。向包被了单抗的微孔中依次加入植物油菜素内酯,再和HRP标记的植物油菜素内酯抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过彻底洗涤后加底物TMB显色,TMB在HRP酶的作用下转化为蓝色,并在酸的作用下最终转化为黄色。颜色的变化和反应的程度是呈线性关系的,用酶标仪在450nm波长下测定吸光度值,结合标准曲线,即可计算出样品中植物油菜素内酯的含量。通常以试剂盒的形式出现。


服务热线 Online
400-075-0108