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阿魏酸含量检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-06-07 | 20 次浏览 | 分享到:

阿魏酸是肉桂酸的衍生物之一,化学名称是3-甲氧基-4-羟基肉桂酸。在阿魏、当归、川芎、升麻、酸枣仁等中药材中含量还是比较高的,食物中的谷壳、咖啡、米糠等也有,具有抗氧化的作用,可以从植物中直接提取。在植物中,阿魏酸很少以游离态的形式存在,主要是低聚糖、多胺、脂类和多糖的结合态。



检测植物样品中阿魏酸的含量,主要的方法包括高效液相色谱(HPLC)法、薄层扫描法、薄层分光光度计法、高效毛细管电泳法等,这里就HPLC简单的介绍一下原理和基本过程。



HPLC检测原理:将样品溶解、提取、过滤处理,滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长323nm处检测阿魏酸的吸收值。制作标准曲线,根据样品检测峰值,计算出阿魏酸的含量。



样品的制备,对于植物的样品是要进行适当的处理才能上机检测的。将样品粉碎,过40目筛,精密称量0.5g,加入甲醇30mL,加热回流提取1h,过滤,残留物再分别用10mL的甲醇洗涤2次,合并提取液,蒸干,用甲醇定容10mL容量瓶。这个过程看起来是繁琐的,可每一个步骤都是非常重要的。要想获得准确的数据,就要求每个步骤的量都是准确的、到位的,没有杂质污染的。



绘制标准曲线,做HPLC检测的人都很清楚,这是必须要做的。标曲就要用到标准品,按说明书或国标的要求进行测定。精密吸取标准品溶液2、8、12、16、20μL注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器,于波长323nm处测定阿魏酸的吸收值,以进样量对峰面积绘制标准曲线,进行线性回归,得到回归方程。


我们的最终目标是为了检测样品中的阿魏酸含量,精密吸取10uL的样品溶液,注入到HPLC中,采用紫外检测器,在323nm的地方测定峰值,结合标准曲线,计算出样品中的阿魏酸含量。


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