β-葡萄糖苷酶又称为β-D-葡萄糖苷葡萄糖水解酶,它属于纤维素酶类,是纤维素分解酶系中的重要组成部分。在纤维素分解的过程中,能够水解结合于末端非还原性的β-D-葡萄糖键,释放出β-D-葡萄糖。它广泛的存在于植物、动物、微生物细胞内,在饲料、食品、医药和生物燃料等领域都具有广泛的应用前景。

检测β-葡萄糖苷酶活性,一般采用分光光度法。在实验室操作的时候,也有用现成的生化检测试剂盒。这里介绍一下水杨苷水解法,它的主要原理是:β-葡萄糖苷酶可将纤维二糖(水杨苷为以葡萄糖苷键连接的纤维二糖)水解成葡萄糖分子。因此,以水杨苷(又称水杨素,Salicin)为底物,利用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定β-葡萄糖苷酶催化其水解形成的还原糖的量,可以测定该酶的催化活性。
检测试剂:50 mmol/L、pH 5.5醋酸钠缓冲液、提取缓冲液、50 mmol/L、pH 4.5柠檬酸缓冲液、1%水杨苷溶液、3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂。
检测设备:恒温水浴锅、分光光度计、电子天平、试管、移液器、具塞刻度试管、容量瓶、烧杯等。

测定过程:取1.5 mL 0.5%水杨苷溶液和0.5 mL酶提取液于25 mL具塞刻度试管中,在37 ℃水浴中保温1 h。取出后,立即向试管中加入1.5 mL DNS试剂以终止酶促反应,充分摇匀。然后在沸水浴中煮沸5 min,取出冷却后用蒸馏水稀释至25 mL,充分混匀,在波长540 nm处测定显色液的吸光度值。
计算结果:根据吸光度值和标准曲线计算β-葡萄糖苷酶活性。